[发明专利]神经内分泌肿瘤靶向纳米粒子显像剂及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及放射性药物化学和临床核医学技术领域，具体地说，涉及一种神经内分泌肿瘤靶向纳米粒子显像剂及其制备方法与应用。

背景技术

神经内分泌肿瘤(neuroendocrine tumours,NETs)，是来源于神经内分泌细胞的一大类肿瘤，多发生于消化系统，但可散在发生于人体其它多个器官。在过去30年间，NETs的发病率提高约5倍。超过60％的神经内分泌肿瘤患者诊断时已处于晚期。影像检查常在NET的初始诊断和后期的病情监测中非常关键。初始的目的包括鉴别原发肿瘤、评估疾病的范围和制定治疗计划。后期的影像检查目的主要是手术后或治疗后疾病稳定期的监测，或疗效评估。敏感、准确、特异性的NET靶向探针是进行影像学检查的关键。

发明内容

本发明的目的是提供一种神经内分泌肿瘤靶向纳米粒子显像剂及其制备方法与应用。

为了实现本发明目的，本发明首先提供一种神经内分泌肿瘤靶向纳米粒子，其为偶联有奥曲肽(Octreotide)的NIRF-CCPM纳米粒子，即NIRF-CCPM-Octreotide；其中NIRF-CCPM纳米粒子与Octreotide通过共价键连接。

立足于NIRF-CCPM纳米粒子，通过多种方式，合成获得可用于神经内分泌肿瘤双模态显像/治疗的多功能纳米分子探针。

本发明还包括所述偶联有奥曲肽的NIRF-CCPM纳米粒子即NIRF-CCPM-Octreotide在制备肿瘤靶向纳米粒子显像剂中的应用；尤其是在制备神经内分泌肿瘤靶向纳米粒子显像剂中的应用。

其中，NIRF-CCPM纳米粒子，即近红外核交联聚合胶束纳米粒子，其构建方法参考文献([1]Z Yang,SY Zheng,WJ Harrison,J Harder,XX Wen,JG Gelovani,A Qiao,C Li*.Long-Circulating Near-Infrared Fluorescence Core-Cross-Linked Polymeric Micelles:Synthesis,Characterization,and Dual Nuclear/Optical Imaging.Biomacromolecules.2010,8,3422-3428)。简述如下：

采用叔丁基-氨乙基乙醇为原料，合成的2-溴代异丁酸t-Boc-氨基乙酯。通过三氟乙酸脱t-Boc-保护后，获得了高纯度的反应前体2-溴代异丁酸2-氨基乙酯三氟乙酸盐。聚-(PEG-丙烯酸)-b-聚-(三乙氧基硅烷基丙烯酸酯)(PPEGMA-b-PESPMA)的合成是通过原子转移聚合(ATRP)，通过先导化合物2-氨基乙基2-溴代异丙烯酸酯与催化剂CuBr反应制备得到的。表面为氨基的CCPM纳米粒子是用两性嵌段聚合物PPEGMA-b-PESPMA和NIRF染料3-(triethoxysilyl)propyl-Cy7合成得到。将水加入含嵌段聚合物(10mg/mL)和疏水性的NIRF燃料3-(triethoxysilyl)propyl-Cy7的THF中，自然形成聚合胶束。当向溶液中加入乙酸后，聚合胶束经历了一个溶胶-凝胶反应过程。首先乙氧基硅烷前体快速水解，PESPMA核与Cy7-衍生物交联形成Si-O键。交联核提供了一个稳定的胶束纳米结构，从而避免了临界胶束聚合产生的不稳定性。制备的CCPM采用透析法纯化，并用0.7μm、0.45μm、0.2μm和0.1μm的滤膜进行序贯过滤，然后采用截留分子量30000道尔顿的膜进行超滤，离心浓缩得到所需浓度的近红外荧光-核交联聚合胶束纳米粒子(NIRF-CCPM)。

将疏水性的荧光染料嵌入纳米核内，有利于改善纳米粒子表面亲水性，降低巨噬细胞的吞噬。本发明提供的NIRF-CCPM纳米粒子有较好的肿瘤摄取和较长的血液保留时间，而且肝脾等网状上皮组织摄取低，肿瘤显像非常清晰。为进一步开展肿瘤分子靶向研究提供了良好的平台和纳米载体体系。

本发明还提供制备所述肿瘤靶向纳米粒子的方法，用螯合剂NOTA对NIRF-CCPM纳米粒子表面氨基进行修饰，得到NOTA-NIRF-CCPM，然后对奥曲肽进行羧基化修饰，得到含有羧基结构的奥曲肽(Octreotide-COOH)，然后将Octreotide-COOH偶联至NOTA-NIRF-CCPM表面，即可。

本发明还提供一种神经内分泌肿瘤靶向纳米粒子显像剂，其是以所述肿瘤靶向纳米粒子作为标记前体，使用时进行⁶⁴Cu核素标记。其制备方法包括以下步骤：