[发明专利]一种皮肤创伤修复肽WHPP-OA1及其提纯方法与应用

说明书

本发明公开了一种皮肤损伤修复肽WHPP‑OA1WHPP‑OA1，所述修复肽WHPP‑OA1包含的氨基酸序列为IGKPPDTWKHLASKLKCI，本发明还公开了所述修复肽WHPP‑OA1的提纯方法和应用。本发明所述皮肤创伤修复肽WHPP‑OA1可加速体表皮肤的创口愈合，减少疤痕产生，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种皮肤创伤修复肽WHPP-OA1及其提纯方法与应用。

背景技术

皮肤创伤修复一直是临床医学领域中比较棘手的问题。皮肤是人体最大的器官，是人体和外界环境之间的物理屏障，并且承担着诸多重要的生理功能，包括排汗、热感和痛觉等。一旦皮肤被破坏，就会引起机体内外环境失调，从而继发营养不良、多器官衰竭甚至导致死亡。传统的促创伤修复药物都有一定的局限性，比如成本高、活性相对较低并且容易造成增生性瘢痕愈合。因此，寻找新型促创伤修复药物是非常重要和非常有必要的。与传统促创伤修复药物相比，多肽类具有高活性、高特异性以及高稳定性等特性。目前，已经发现许多活性多肽，如抗菌肽、镇痛肽、抗癌多肽等，但是具有促创伤修复作用的多肽还很少报道。

两栖动物的生活环境复杂，它们的皮肤裸露、光滑、潮湿，容易受到各种病原微生物侵袭和紫外线辐射损伤。 在长期的自然选择过程中，两栖动物逐渐进化出了独特的、高效的皮肤多肽防御系统。广泛的研究表明：两栖动物皮肤受到创伤后能快速修复，因此两栖动物皮肤被视为具有巨大开发潜力的促创伤修复药物资源宝库。两栖动物皮肤包含丰富的小分子多肽，这些小分子肽具有各种生物活性，如抗菌性、抗氧化性以及免疫活性。 然而，到目前为止，对于两栖动物皮肤具有皮肤促创伤修复活性多肽的认知还非常匮乏。

为此，本发明提供了一种来源于云南臭蛙 (Odorrana andersonii) 的具促创伤修复活性的多肽及其提纯方法和应用。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种皮肤创伤修复肽WHPP-OA1，所述修复肽WHPP-OA1包含的氨基酸序列为IGKPPDTWKHLASKLKCI。

本发明的第二目的在于提供一种所述皮肤创伤修复肽WHPP-OA1的提纯方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）用电刺激法取云南臭蛙活体皮肤分泌物，溶解于PBS，真空冷冻干燥，获得皮肤分泌物冻干粉-80℃保存备用；

（2）将所述冻干粉用Sephadex G75排阻层析进行分离；

（3）将步骤（2）的分离产物进行第一次高效液相色谱反相层析，并收集具促创伤修复功能的活性组分；

（4）将所述活性组分进行第二次高效液相色谱反相层析，得到纯化的修复肽WHPP-OA1。

本发明的第三目的在于提供所述皮肤创伤修复肽WHPP-OA1的应用，其特征在于，将所述创伤修复肽WHPP-OA1用于加速体表皮肤的创口愈合，减少疤痕产生。

本发明的第四目的在于提供一种含有所述皮肤创伤修复肽WHPP-OA1的外用药品。

本发明的第五目的在于提供一种含有所述皮肤创伤修复肽WHPP-OA1的外用护肤品。

附图说明

图1为本发明云南臭蛙皮肤促创伤修复肽WHPP-OA1的Sephadex G75分子筛层析图。

图2为本发明云南臭蛙皮肤促创伤修复肽WHPP-OA1的第一次HPLC反相C18柱层析图。

图3为本发明云南臭蛙皮肤促创伤修复肽WHPP-OA1的第二次HPLC反相C18柱层析图。

图4 为本发明分离纯化云南臭蛙皮肤促创伤修复肽WHPP-OA1的HaCat的促创伤修复活性图；