[发明专利]一种荧光生物传感器、制备方法及其对铜离子、焦磷酸根和碱性磷酸酶的检测应用有效
申请号: | 201711090704.2 | 申请日: | 2017-11-08 |
公开(公告)号: | CN107976427B | 公开(公告)日: | 2020-10-30 |
发明(设计)人: | 王广凤;陈纪华 | 申请(专利权)人: | 安徽师范大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 芜湖安汇知识产权代理有限公司 34107 | 代理人: | 任晨晨 |
地址: | 241000 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 荧光 生物 传感器 制备 方法 及其 离子 磷酸 碱性磷酸酶 检测 应用 | ||
1.一种荧光生物传感器的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
1)将DNA序列溶解在Tris-HCl缓冲溶液中,得DNA缓冲溶液,备用;
2)、将步骤1)制备的缓冲溶液与K+溶液混合培养,形成G-四连体;
3)、将步骤2)得到的G-四连体与ThT混合反应,20℃-50℃下反应1min-15min即得;
步骤1)中所述DNA序列为:AGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGG;
步骤2)中所述的K+溶液浓度为10mM-50mM。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤2)中所述混合培养是指20℃-50℃下培养1h-3h。
3.一种采用权利要求1或2所述的方法制备的荧光生物传感器。
4.一种采用权利要求3所述的荧光生物传感器检测铜离子的应用;具体检测铜离子的方法为:
将荧光生物传感器与不同浓度的铜离子溶液于20℃-50℃培养1min-15min,测量荧光信号;构建铜离子与荧光强度的线性关系,实现对铜离子的检测。
5.一种采用权利要求3所述的荧光生物传感器检测焦磷酸根的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,具体检测焦磷酸根的方法为:
将荧光生物传感器与铜离子溶液于20℃-50℃培养1min-15min后,加入不同浓度的焦磷酸根溶液于20℃-50℃培养10min-30min,测量荧光信号;构建焦磷酸根与荧光强度的线性关系,实现对焦磷酸根的检测。
7.一种采用权利要求3所述的荧光生物传感器检测碱性磷酸酶的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,具体检测碱性磷酸酶的方法为:将荧光生物传感器与铜离子溶液于20℃-50℃培养1min-15min,加入焦磷酸根溶液于20℃-50℃培养10min-30min,然后再加入不同浓度的碱性磷酸酶溶液,20℃-50℃培养40min-80min,测量荧光信号;构建碱性磷酸酶与荧光强度的线性关系,实现对碱性磷酸酶的检测。
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