[发明专利]一种利用牛蒡根干粉和奶粉包埋、生产益生菌粉的方法

权利要求书

1.一种利用牛蒡根干粉和奶粉包埋、生产益生菌粉的方法，包括如下步骤：制备牛蒡根干粉，利用嗜酸乳杆菌株JSX-A1和嗜热乳酸链球菌株JSX-T1的一种或两种进行发酵，然后，将牛蒡根干粉和奶粉按一定比例进行配制后与发酵液混合，深冷冻干燥，制备益生菌粉。

2.根据权利要求1所述的一种利用牛蒡根干粉和奶粉包埋、生产益生菌粉的方法，其特征在于：将制备的益生菌粉进行人工胃液处理，再检测益生菌的活性，得到益生菌仍保持90%以上活性的牛蒡根干粉和奶粉的合理配制比例。

3.根据权利要求1所述的一种利用牛蒡根干粉和奶粉包埋、生产益生菌粉的方法，其特征在于，具体步骤为：

（1）牛蒡根干粉的制备：鲜牛蒡根洗干净后切片，置于沸水中3-5分钟，捞出，沥干，于60℃烘干；然后，粉碎烘干的牛蒡根片成牛蒡根粉；

（2） 牛蒡根干粉和奶粉进行辐射灭菌，保存备用；

（3）用固体MRS培养基、37℃条件下活化JSX-A1和JSX-T1菌种；

（4）接种活化的JSX-A1、JSX-B1或二者的混合物于MRS液体培养基中；

（5）在200rpm、37℃条件下发酵约2-3天；

（6）取样检测，包括：发酵液pH值及镜检与乳酸菌计数；

（7）发酵液pH值4.0-4.5、乳酸菌数达到10¹²/ml时终止发酵；

（8）将（2）中制备的干燥牛蒡根粉和奶粉以重量比为1-3：1、按10%的量添加进发酵液中，混匀，然后冷冻干燥成冻干粉；10%指干燥牛蒡根粉和奶粉混合物质量与发酵液体积的百分比；单位为g/L。

4.根据权利要求3所述的一种利用牛蒡根干粉和奶粉包埋、生产益生菌粉的方法，其特征在于，MRS固体培养基的配置：10g/L蛋白胨、10g/L牛肉膏、5g/L酵母粉、20g/L葡萄糖、5g/L无水乙酸钠、1ml/L吐温-80、2g/L柠檬酸二胺、2g/L磷酸氢二钾、0.58g/L硫酸镁、0.25g/L硫酸锰，用蒸馏水溶解，调节pH 6.6-6.8，然后，添加2%琼脂，定容；高压1×10⁵Pa灭菌20min；

MRS液体培养基的配置：10g/L蛋白胨、10g/L牛肉膏、5g/L酵母粉、20g/L葡萄糖、5g/L无水乙酸钠、1ml/L吐温-80、2g/L柠檬酸二胺、2g/L磷酸氢二钾、0.58g/L硫酸镁、0.25g/L硫酸锰，用蒸馏水溶解，调节pH 6.6-6.8，并定容；高压1×10⁵Pa灭菌20min。

5.根据权利要求3所述的一种利用牛蒡根干粉和奶粉包埋、生产益生菌粉的方法，其特征在于，还包括如下步骤：

（9）益生菌粉的人工胃液处理：取1g益生菌粉，用4ml无菌生理盐水悬浮、洗涤后离心，再用4ml 10mM、pH7.4的PBS 缓冲液洗涤菌体一次，离心，所得菌体加入5ml的人工胃液和1.5ml PBS缓冲液，最终pH2.7，振荡均匀后放入37℃恒温水浴锅保温3h；

（10）益生菌的活性检测：人工胃液处理前后分别取样稀释涂平板，进行活菌计数，比较处理3h前后的活菌数繁殖情况，以鉴定益生菌粉的耐强酸性；

（11）牛蒡根干粉与奶粉配制比例的优化选择:人工胃液处理前后益生菌的耐强酸性没有发生显著变化（活性仍保持在90%以上）的牛蒡根干粉与奶粉配制比例就是优化选择。

6.根据权利要求5所述的一种利用牛蒡根干粉和奶粉包埋、生产益生菌粉的方法，其特征在于，人工胃液的制备：将0.2gNaCl和0.35g胃蛋白酶溶于适量蒸馏水中，用HCl调节pH值至2.0，定容至100ml；然后，用0.25µm的微孔滤膜过滤灭菌后备用。