[发明专利]PDGFRA基因突变检测体系及其试剂盒

权利要求书

1.一种PDGFRA基因突变检测体系，其特征在于：包括用于检测PDGFRA基因第12外显子V516D位点的上下游引物A，用于检测PDGFRA基因第18外显子D842V位点的上下游引物B，荧光染料SYBR Green，以及肽核酸；

所述上游引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；

所述上游引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，所述下游引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；

所述肽核酸包括核苷酸序列与PDGFRA野生型基因第12外显子V516D位点完全互补且核苷酸序列如SEQ ID No.5所示的肽核酸A，以及核苷酸序列与PDGFRA野生型基因第18外显子D842V位点完全互补且核苷酸序列如SEQ ID No.6所示的肽核酸B。

2.根据权利要求1所述的PDGFRA基因突变检测体系，其特征在于：所述上下游引物A、B进行了LNA修饰。

3.根据权利要求1所述的PDGFRA基因突变检测体系，其特征在于：所述上下游引物A、B在反应体系中的最终浓度均为0.1～0.3μM/L。

4.根据权利要求3所述的PDGFRA基因突变检测体系，其特征在于：所述上下游引物A在反应体系中的最终浓度为0.19μM/L，所述上下游引物B在反应体系中的最终浓度为0.2μM/L。

5.根据权利要求1所述的PDGFRA基因突变检测体系，其特征在于：所述肽核酸A、B在反应体系中的最终浓度均为1～1.5μM/L。

6.根据权利要求5所述的PDGFRA基因突变检测体系，其特征在于：所述肽核酸A、B在反应体系中的最终浓度均为1.25μM/L。

7.一种采用如权利要求1所述的检测体系的PDGFRA基因突变检测产品。

8.一种PDGFRA基因突变检测试剂盒，其特征在于：包括PCR检测液A、PCR检测液B和SYBR Green混合液；

所述PCR检测液A包括用于检测PDGFRA基因第12外显子V516D位点的上下游引物A和肽核酸A，所述PCR检测液B包括用于检测PDGFRA基因第18外显子D842V位点的上下游引物B和肽核酸B；

所述上游引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，

所述上游引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，所述下游引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，

所述肽核酸包括核苷酸序列与PDGFRA野生型基因第12外显子V516D位点完全互补且核苷酸序列如SEQ ID No.5所示的肽核酸A，以及核苷酸序列与PDGFRA野生型基因第18外显子D842V位点完全互补且核苷酸序列如SEQ ID No.6所示的肽核酸B。

9.根据权利要求8所述的PDGFRA基因突变检测试剂盒，其特征在于：所述上下游引物A、B进行了LNA修饰；所述上下游引物A、B在反应体系中的最终浓度均为0.1～0.3μM/L；所述肽核酸A、B在反应体系中的最终浓度均为1～1.5μM/L。

10.根据权利要求8所述的PDGFRA基因突变检测试剂盒，其特征在于：还包括阳性对照P1、阳性对照P2和阴性对照；

所述阳性对照液P1是浓度为100ng/μL的包含PDGFRA基因第12外显子V516D位点和第18外显子D842V位点的野生型质粒溶液；

所述阳性对照液P2是浓度为100ng/μL的包含PDGFRA基因第12外显子V516D位点和第18外显子D842V位点的突变型质粒溶液；

所述阴性对照液是不含PDGFRA基因的基因组DNA溶液。