[发明专利]一种矾根品种“桃花星木”离体再生体系建立的方法在审
申请号: | 201711096523.0 | 申请日: | 2017-11-09 |
公开(公告)号: | CN109757367A | 公开(公告)日: | 2019-05-17 |
发明(设计)人: | 束晓春;李乃伟;吴尤宏 | 申请(专利权)人: | 江苏省中国科学院植物研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧水县白*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 不定芽 继代增殖培养 桃花 离体再生 体系建立 繁殖 愈伤组织诱导 分化诱导 生根培养 有效解决 愈伤组织 种苗繁殖 组织培养 花序轴 试管苗 外植体 成苗 继代 炼苗 切割 消毒 | ||
1.一种矾根品种“桃花星木”离体再生体系建立的方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)外植体的选取与消毒:选取生长20d左右的花序轴作为外植体,冲洗干净后,进行消毒,消毒过程为:用清水冲洗干净,然后用安利洗涤剂漂洗一次,摇床上振荡15-20min;流水冲洗20-30min后,于无菌操作台上用75%乙醇消毒10-20s,立即倒入0.1%的升汞消毒12min,最后用无菌水洗涤4次,每次振荡3-5min,将消毒完毕的花序轴切割为2cm长的小段;
(2)愈伤组织的诱导:取步骤(1)中处理得到的外植体小段,以斜面放置方式接种于诱导培养基(事先将培养基倒斜面)中进行愈伤组织的诱导,培养温度为25±2℃,首先在黑暗中培养10d,然后进行光照培养25d;所述光照培养条件为:光照时间为14h/d,光照强度为1500lx;所述诱导培养基为MS+6-BA0.6mg/L+IBA0.02mg/L,pH值为5.8-6.0;
(3)愈伤组织的分化:将步骤(2)中诱导得到的愈伤组织,诱导35d后,在外植体上切下,接入分化培养基进行不定芽分化,培养温度为25±2℃;光照时间14h/d,光照强度2500lx;所述诱导培养基为N6+CPPU 0.3mg/L+IBA0.01mg/L,pH值为5.8-6.0;
(4)不定芽的继代增殖:将诱导得到的不定芽切割后,每芽带0.3cm左右茎段和3-4片叶片,接入继代增殖培养基中进行继代培养25d,培养温度为25±2℃,光照时间为14h/d,光照强度为2500lx;所述继代增殖培养基为MS+6-BA0.2mg/L,pH值为5.8-6.0;
(5)根的诱导:将步骤(3)中继代增殖得到的试管苗接入生根培养基中进行生根培养15d,培养温度为25±2℃,光照时间为14h/d,光照强度为2000lx;所述生根培养基为MS+2.0mg/L IBA,pH值为5.8-6.0;待不定根长满瓶底,植株整体生长稳健时,可准备移苗出瓶;
(6) 将培养瓶的瓶盖打开,炼苗2-3天,移栽入扦插基质中,所述扦插基质优选为:按照2:2:1的体积比例将泥炭土、蛭石和珍珠岩混匀,地上部分喷洒0.1%的多菌灵,每天喷水2次,保证湿度,避免阳光直射。
2.根据权利要求1所述矾根品种“桃花星木”离体再生体系建立的方法,其特征在于,步骤A)中外植体取样时间为4月份。
3.通过权利要求1所述方法制备的矾根品种“桃花星木”种苗。
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