[发明专利]一种阪崎肠杆菌噬菌体EspYZU05及其用途

说明书

本发明属于生物工程领域，涉及一种阪崎肠杆菌噬菌体EspYZU05及其用途。所述的阪崎肠杆菌噬菌体(Enterobacter sakazakii phage)EspYZU05，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2016716。本发明还公开了该噬菌体作为生物抑菌剂的应用。

技术领域

本发明涉及一种阪崎肠杆菌噬菌体分离株，及其作为生物抑菌剂的应用，属于生物工程领域。

背景技术

阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)是一种食源性致病菌，可引起新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症等。目前在世界范围内报道过多起阪崎肠杆菌的感染事件，死亡率高达50％～80％。婴幼儿配方奶粉是新生儿感染的主要来源，同时在其他乳制品等及其生产环境中也经常分离到该菌。针对乳制品生产中阪崎肠杆菌的污染特点，采取相应杀菌措施降低阪崎肠杆菌带来的风险至关重要。阪崎肠杆菌在巴氏杀菌温度下无法生存，因此在奶粉热加工后续工艺阶段最有可能发生阪崎肠杆菌的污染。加工器具和生产环境中少量的阪崎肠杆菌在原料及产品中均可能繁殖生长达到致病剂量。目前，生产商常用化学消毒剂对加工器具、管道及生产环境等进行消毒以确保产品安全，但阪崎肠杆菌在适应自然环境生长过程中，其产生的胶囊状结构使阪崎肠杆菌极易吸附在食品、加工器具、输送管道等的表面形成生物被膜，被膜内细菌对化学消毒剂等不良环境的抵抗能力显著增强，很难被清除，从而导致持续性污染，给乳制品生产加工业带来严重危害。另一方面，近年来对食品安全和绿色食品的需求的增加，亟需开发天然无害的抑菌剂应用于乳制品安全控制。

噬菌体是一类能够感染细菌的病毒。裂解性噬菌体感染细菌后，可在宿主菌内快速增殖，并使之裂解，故又称烈性噬菌体。噬菌体在自然界中的分布极为广泛，并且对宿主菌具有专一性。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种对阪崎肠杆菌具有强裂解作用的噬菌体制剂，该制剂可以单独或复配使用，能够有效控制生物被膜形成、抑制阪崎肠杆菌的繁殖与代谢。

本发明所述的阪崎肠杆菌噬菌体(Enterobacter sakazakii phage)EspYZU05，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2016716。

本发明进一步公开了所述阪崎肠杆菌噬菌体(Enterobacter sakazakii phage)EspYZU05在制备抑菌剂中的应用。

本发明还提供了一种阪崎肠杆菌抑菌剂，是含有所述的噬菌体EspYZU05的分离物或培养物。以所述的噬菌体EspYZU05的分离物或培养物作为抑菌成分。

本发明从乳品厂污水样品中分离出一株阪崎肠杆菌噬菌体EspYZU05(Enterobacter sakazakii phage EspYZU05)，保藏在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，保藏地址：武汉武汉大学；保藏编号：CCTCC NO：M 2016716；保藏日期：2016年12月2日。

本发明中的阪崎肠杆菌噬菌体EspYZU05具有以下生物学特征：

(1)形态学特征：通过透射电镜观察，头部对称，直径约为55nm，尾长约为10nm，得的噬菌体的形态学特征应归于短尾噬菌体科。

(2)噬菌体核酸类型：噬菌体为dsDNA。

(3)噬菌体基因组特征：EspYZU05基因组全长为41,723bp，其中编码基因总长度分别为38,820bp，平均长度分别为826bp，占总长的93.04％，GC含量为55.69％，有47个开放阅读框(ORFs)。47个ORFs编码蛋白中有1个ORFs在数据库中搜不到同源性基因，46个ORFs编码的蛋白在数据库中找到同源性序列，其中30个ORFs编码的蛋白为假设蛋白，有16个蛋白序列功能明确，基因组数据显示EspYZU05为一种新的噬菌体。

(4)具有强烈的阪崎肠杆菌裂解性能。