[发明专利]一种矾根品种“平静绿洲”组织培养繁殖的方法

说明书

本发明公开了一种矾根品种“平静绿洲”组织培养繁殖的方法，该方法包括以下步骤：（1）选取外植体并进行消毒；（2）将处理后的花序轴切割后，进行愈伤组织诱导培养；（3）将愈伤组织进行分化诱导不定芽；（4）将不定芽继代增殖培养成苗；（5）对继代增殖培养后的试管苗进行生根培养；（6）炼苗培养。采用该繁殖方法对矾根品种“平静绿洲”进行组织培养，一个继代周期（35d）不定芽增殖率为10倍以上，繁殖速度快，有效解决了种苗繁殖的难题。

技术领域

本发明具体涉及一种矾根（Heuchera micrantha)组织培养的繁殖方法。

背景技术

矾根（Heuchera micrantha)又名珊瑚铃，为虎耳草科矾根属多年生草本花卉。其园艺品种繁多，叶色丰富多彩，且不同的季节、环境和温度下叶片的颜色还会有丰富的变化，是理想的宿根花境材料。目前，矾根植物深受家庭园艺小型花卉爱好者的喜爱，部分品种的电商销售供不应求。此外，在园林中也有用于林下花境、地被、庭院绿化等，是优良的荫生环境宿根彩叶花卉。

矾根植物喜半荫，耐全光，耐低温，忌过度潮湿，适宜在我国北方种植，南方种植多数品种存在着越夏困难的问题（黄少玲，汪华清，周意峰等，2016，矾根在东莞地区引种驯化过程中的夏季适应性研究，热带林业，44(4):4-7）。但矾根植物品种众多，在华东地区也有适宜粗放管理的品种，如平静绿洲、鸡尾酒、饴糖、平静绿洲等。而其中“平静绿洲”品种的适应性最佳，叶片为红色。较之其他华东地区适生品种，“平静绿洲”更加符合园林园艺设计师的需求。

目前，矾根植物的繁殖方式有叶插、分株和组培方式，但前2种方式繁殖速度较慢，不能满足市场需求。梁芳等采用的分株繁殖，成活率不到50%（5种宿根花卉品种生长习性评价及栽培研究，草原与草坪，2009(6) ：43-46）。因此，建立组织培养快速繁殖体系是解决优良品种种苗短缺的最有效途径。矾根属植物的组织培养，已见有报道，但外植体多数选择新芽或腋芽茎段等，孙国峰等研究培养的银王子品种继代繁殖率达15-20倍（矾根杂种‘银王子＇的组织培养和快速繁殖，植物生理学通讯，2007，43(3):500-500）；章志红等研究培养的紫宫殿品种继代繁殖率达9.3倍（美洲矾根品种紫宫殿组织培养与离体快繁研究，江苏农业科学，2011，(5):69-71）；陈宏等研究培养的‘brownies’品种继代繁殖率仅3.5倍，且玻璃化严重，有效芽少（矾根的组织培养与快速繁殖，上海农业学报，2011，27(4):80-82）。矾根“平静绿洲”品种的快繁体系尚未见有报道。组培快繁体系受母本外植体限制，外植体简单消毒后污染率过高，过度消毒又易形成褐变，无菌系建立比较困难。因此，发明人以花序轴为外植体，建立的矾根品种平静绿洲的离体再生快繁体系，为解决平静绿洲种苗短缺的重要途径之一，对矾根的开发和推广利用都具有着非常重要的意义

发明内容

本发明的目的是为了建立矾根品种平静绿洲组织培养繁殖体系。

为了达到上述目的，本发明提供了一种矾根品种“平静绿洲”花序轴离体再生体系建立的方法，包括如下步骤：

（1）外植体的选取与消毒：选取生长20d左右的花序轴作为外植体，冲洗干净后，进行消毒，消毒过程为：用清水冲洗干净，然后用安利洗涤剂漂洗一次，摇床上振荡15-20min；流水冲洗20-30min后，于无菌操作台上用75％乙醇消毒10-20s，立即倒入0.1％的升汞消毒12min，最后用无菌水洗涤4次，每次振荡3-5min，将消毒完毕的花序轴切割为2cm长的小段。

（2）愈伤组织的诱导：取步骤（1）中处理得到的外植体小段，以斜面放置方式接种于诱导培养基（事先将培养基倒斜面）中进行愈伤组织的诱导，培养温度为25±2℃，首先在黑暗中培养10d，然后进行光照培养25d；所述光照培养条件为：光照时间为14h/d，光照强度为1500lx；所述诱导培养基为MS+6-BA0.6mg/L+IBA0.02mg/L，pH值为5.8-6.0；