[发明专利]一种岷江蓝雪花继代快繁方法

权利要求书

1.一种岷江蓝雪花继代快繁方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

将经预先组培繁育所得岷江蓝雪花子代的无菌苗，剪成各茎段带一个叶片的外植体，置于无外源激素的培养基中进行扩繁增殖培养；所述无外源激素的培养基为添加蔗糖和琼脂的MS培养基；

所述预先组培繁育的方法为：

对岷江蓝雪花盆栽进行杀菌，然后取岷江蓝雪花枝条上半部分幼嫩带芽的茎段作为外植体，对外植体进行消毒，再依次经过腋芽诱导培养、腋芽增殖培养和生根培养；

进行所述腋芽诱导培养时，采用的培养基为添加6-BA和NAA的MS培养基；

进行所述腋芽增殖培养时，采用的培养基为添加6-BA和NAA的MS培养基；

进行所述生根培养时，采用的培养基为添加IBA的1/2MS培养基。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述岷江蓝雪花子代为经预先组培繁育所得岷江蓝雪花子代第1代至第9代中的任何一代。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在对岷江蓝雪花子代的无菌苗剪成各茎段带一个叶片的外植体时，外植体上的叶片仅保留其1/3部分。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行所述腋芽诱导培养时，将进行消毒后所得外植体剪成1.5～2cm长小段，每个小段上保留1～2个叶芽；并将其接种在添加1.0mg·L^-16-BA和0.1mg·L^-1NAA的MS培养基上，进行腋芽诱导培养。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行所述腋芽增殖培养时，将诱导出的1～2cm长腋芽转接至添加2.0mg·L^-16-BA和0.1mg·L^-1NAA的MS增殖培养基上，进行腋芽增殖培养。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行所述生根培养时，选取茎长2.0cm以上的健壮无根单苗接种至添加0.5mg·L^-1IBA的1/2MS培养基上进行生根培养。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行所述杀菌时，采用的方法为：取材开始前的一个月，每周对岷江蓝雪花盆栽进行一次多菌灵400倍叶面喷施和浇灌，共计4次。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行所述消毒时，采用的方法为：用流水清除表面多余杂质和污垢后，用洗洁精浸泡30min，随后用毛刷轻轻刷去其表面已被软化的顽固杂质，最后用温和的流水冲洗2～3h，自然沥干；之后在超净工作台上使用75％的乙醇处理30s，接着用无菌水冲洗3～4次，然后用0.1％的升汞进行连续两次4min的消毒。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述无外源激素的培养基中添加30g·L^-1蔗糖、6g·L^-1琼脂，pH为5.8。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行所述扩繁增殖培养时，培养条件为：培养温度20～28℃，光照度1500～2500Lx，光照时间8～12h/d。