[发明专利]一种致幻蘑菇斑褶菇菌种的获得方法有效
申请号: | 201711107386.6 | 申请日: | 2017-11-10 |
公开(公告)号: | CN108117999B | 公开(公告)日: | 2021-06-22 |
发明(设计)人: | 李传华;陈明杰;张劲松 | 申请(专利权)人: | 上海市农业科学院 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12N1/02;C12R1/645 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所(普通合伙) 31233 | 代理人: | 黄志达;魏峯 |
地址: | 201106 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蘑菇 斑褶菇 菌种 获得 方法 | ||
1.一种致幻蘑菇斑褶菇菌种的获得方法,包括:
从牛粪上采集野生致幻蘑菇斑褶菇子实体,去除基部牛粪和表面杂物,在无空气对流房间中选取菌肉组织,放置于已灭菌的含特定成分的培养基中,在室温暗光下培养3-5d,获得致幻蘑菇斑褶菇的菌种;其中,含特定成分的培养基由以下组分组成:干牛粪4-6g、琼脂20-25g、硫酸镁0.1-0.3g、磷酸氢二钾0.1-0.3g、磷酸氢二钠0.1-0.3g、氯化钙0.1-0.2g、氯化铁1.0-2.0mg、硫酸锌0.2-0.3g、硫酸铜1-2mg、尼克酸10-12mg、葡萄糖20-25g、酵母膏15-20g、叶酸10-15mg、生物素15-20mg、维生素B1 100-200mg和维生素C1-2g,加水定容至1000ml;
含特定成分的培养基的制备方法包括:按配比,将干牛粪加入到800-1000ml水中,煮沸5-10min,用4层纱布过滤,取滤液再进行8层纱布过滤;然后加入琼脂充分溶解,待琼脂完全融化后依次加入硫酸镁、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、氯化钙、氯化铁、硫酸锌、硫酸铜、尼克酸、葡萄糖、酵母膏,待完全融化后,定容至1000ml;121℃灭菌15min,待冷却至40℃后分别加入叶酸、生物素、维生素B1和维生素C,然后分装于容器内,冷凝备用。
2.根据权利要求1所述的一种致幻蘑菇斑褶菇菌种的获得方法,其特征在于:所述菌肉组织大小为1×1mm。
3.根据权利要求1所述的一种致幻蘑菇斑褶菇菌种的获得方法,其特征在于:将得到的致幻蘑菇斑褶菇的菌种转接到普通PDA培养基上进行适应性培养,获得在普通培养基上生长的斑褶菇菌种。
4.根据权利要求1所述的一种致幻蘑菇斑褶菇菌种的获得方法,其特征在于:对获得的致幻蘑菇斑褶菇的菌种和野生斑褶菇子实体进行DNA序列测序,将获得的序列进行比对,序列相似度介于98%-100%则判定为同一种序列,则判定获得的菌种为纯斑褶菇菌种。
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