[发明专利]一种脱苦罗汉果提取物的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种脱苦罗汉果提取物的提取方法。

背景技术

罗汉果，属双子叶植物纲葫芦科罗汉果属植物的果实，主要产于广西、广东、湖南、江西等地。罗汉果的干燥果实为椭圆或圆形，外壳棕褐色或烟熏色，附有大量细小黑色柔毛，比鹅蛋略大。干果较轻，种子、果皮和果肉均可入药。罗汉果的 营养价值极高，含有大量的糖类、蛋白质、维生素、脂肪酸、多种人体必需的氨基酸和微量元素。罗汉果的甜味主要来自于罗汉果皂甙（是糖的甜度的300倍），属于天然的甜味剂。但是罗汉果皂甙的甜度很强，入口以后，在口内的停留时间长，口感不好。并且罗汉果皂甙的水溶性也不是很理想，易在水中结成小团状，要使之全部溶解，需要加热以及较长的搅拌时间。

罗汉果果实中分离并鉴定出了赛门甙Ⅰ、罗汉果甜甙ⅡE、罗汉果甜甙Ⅲ、罗汉果甜甙ⅢE、罗汉果甜甙Ⅳ、罗汉果甜甙Ⅴ、罗汉果甜甙A、罗汉果新甙等葫芦烷素三萜甙类物质，除罗汉果甜甙Ⅳ无甜味，罗汉果新甙为苦味外，均为甜味物质，其中罗汉果甜甙Ⅴ的甜度最高，相当于蔗糖的300倍，且甜味纯正、无异味、回味感强、热稳定性好，可作为食品、菜肴的甜味剂，是糖尿病人的理想糖代品。罗汉果甜甙Ⅴ热稳定性好，在100℃水溶液中稳定，在120℃连续加热12h以上仍不会被破坏，属非发酵物质，利于加工贮存。

目前，从罗汉果提取物的制备方法主要有以下两种，一是水提加树脂分离法，将罗汉果破碎后装入提取罐中，加水提取，多次提取后，合并提取液，过滤，上树脂进行吸附分离，用乙醇或甲醇洗脱，洗脱液去醇后，喷雾干燥而成；二是醇提膜分离法，其工艺是将罗汉果破碎，装入提取罐中，加入乙醇进行提取，多次提取后，合并提取液，过滤，将滤液通过膜分离浓缩，浓缩液真空干燥而成。然而上述方法提取的罗汉果提取物中含有罗汉果新甙，导致罗汉果提取物中有强烈的后苦味，且中药味较浓，影响了罗汉果提取物的口感并限制了其作为天然甜味剂的应用。

因此研究开发一种脱苦且味道较为纯正的罗汉果提取物的方法非常重要，以利于扩大罗汉果提取物的市场。

发明内容

本发明所要解决的技术问题：针对目前罗汉果提取物中含有罗汉果新甙，导致罗汉果提取物中有强烈的后苦味，且中药味较浓，影响了罗汉果提取物的口感的问题，提供一种脱苦罗汉果提取物的提取方法。

为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：

一种脱苦罗汉果提取物的提取方法，该制备方法包括如下步骤：

（1）按质量比1：3~4，将罗汉果苦果、水进行混合，再利用超临界二氧化碳流体提取，得提取液，按质量比1：2~3，将活性炭、提取液进行混合浸泡，过滤，得滤液，将滤液用水、乙醇溶液进行洗脱，直至无色液体流出，收集洗脱液，将洗脱液进行减压蒸馏，回收乙醇，得蒸馏物，备用；

（2）按重量份数计，取50~60份水、20~25份葡萄糖、14~16份琼脂、7~8份蛋白胨、3~4份酵母粉、1~2份磷酸氢二钾、0.5~1份硫酸镁进行混合，高温灭菌，得营养液，按质量比1：3~4，将绿萝的培养土、营养液进行混合发酵2~3d，得发酵物，将发酵物用水稀释，收集上清液；

（3）按重量份数计，取30~40份水、10~15份牛肉膏、7~8份蛋白胨、3~4份氯化钠进行混合，高温灭菌，得培养液，按质量比1：2~3，将上清液、培养液放入培养基中进行培养，每隔1~2d向培养基中加入培养液质量1~2%的步骤（1）备用的蒸馏物，培养7~8d，得培养液a；

（4）将罗汉果放入粉碎机中粉碎，得粉碎物，按质量比1：3~4：0.8~1，将粉碎物、乙醇溶液、培养液a进行混合，高压处理，得处理液，将处理液进行回流提取，得到提取液a；

（5）按质量比1：2~3，将活性炭、提取液a进行混合浸泡，过滤，得滤液a，将滤液a用水、乙醇溶液进行洗脱，直至无色液体流出，收集洗脱液a，将洗脱液a进行超滤，得超滤物，将超滤物进行冷冻干燥，收集干燥物，即得脱苦罗汉果提取物。

所述步骤（1）中超临界二氧化碳流体提取的参数为压力为15~20MPa，温度为55~65℃。

所述步骤（1）中减压蒸馏的参数为真空度为13.3Pa，温度55~65℃。

所述步骤（4）中高压处理为压力为18~28MPa，处理3~8min。

所述步骤（4）中回流提取参数为温度30~60℃，提取60~120min。

所述步骤（5）中超滤的参数为压力为0.1~0.6MPa，温度40~60℃。