[发明专利]一种耳聋左慈丸指纹图谱的检测方法及其应用

权利要求书

1.一种耳聋左慈丸指纹图谱的检测方法，包括下列步骤：

1)供试品溶液的制备：称取耳聋左慈丸粉末，加入甲醇水溶液，超声提取后分层，取上清液过滤后获得续滤液，作为供试品溶液；

2)对照品溶液的制备：分别称取丹皮酚、马钱苷、莫诺苷、芍药苷、5-羟甲基糠醛对照品，加入甲醇水溶液溶解，配成对照品溶液；

3)测定：采用相同色谱条件的高效液相色谱法分别测定供试品溶液和对照品溶液，获得供试品溶液的指纹图谱和对照品溶液的指纹图谱，将供试品溶液的指纹图谱与对照品溶液的指纹图谱进行比较，对供试品溶液指纹图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得耳聋左慈丸指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的一种耳聋左慈丸指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1)和2)中，包括以下条件中任一项或多项：

A1)所述耳聋左慈丸粉末加入的重量与所述甲醇水溶液加入的体积之比为2：20-30，g/ml；

A2)所述耳聋左慈丸粉末与甲醇水溶液在超声提取前，要称重，并在超声提取后冷却，再称重，用甲醇水溶液补足失重，摇匀；

A3)所述超声提取时间为30-60min；

A4)所述分层选自静置分层或离心分层中的一种；

A5)所述甲醇水溶液为体积百分比浓度≥50％的甲醇水溶液；

A6)所述对照品溶液中丹皮酚、马钱苷、莫诺苷、芍药苷、5-羟甲基糠醛的浓度分别为20-100μg/ml、10-100μg/ml、10-100μg/ml、10-100μg/ml、20-100μg/ml。

3.根据权利要求1所述的一种耳聋左慈丸指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤3)中，所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱：C₁₈柱；柱温：25-35℃；检测波长：230-250nm；流速：0.5-1.5ml/min；进样量：5-20μl；流动相：乙腈-0.1-0.2v/v％磷酸水溶液，其中，A相为乙腈，B相为0.1-0.2v/v％磷酸水溶液；分析时间：90min；梯度洗脱。

4.根据权利要求3所述的一种耳聋左慈丸指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的具体程序为：0-12min，A相：B相体积比为5：95-9：91；12-30min，A相：B相体积比为9：91-19：81；30-35min，A相：B相体积比为19：81-19：81；35-50min，A相：B相体积比为19：81-27：73；50-70min，A相：B相体积比为27：73-70：30；70-80min，A相：B相体积比为70：30-94：6；80-90min，A相：B相体积比为94：6-95：5。

5.根据权利要求1-4任一所述的耳聋左慈丸指纹图谱的检测方法，在耳聋左慈丸中成分的质量检测中的应用。

6.一种耳聋左慈丸的质量检测方法，包括采用权利要求1-4任一所述的耳聋左慈丸指纹图谱的检测方法获得耳聋左慈丸指纹图谱，将得到的耳聋左慈丸指纹图谱与相同指纹图谱检测条件下获得的耳聋左慈丸的标准指纹图谱进行相似度比较。