[发明专利]VP53B和VP110抗体及其在制备防治对虾白斑综合征的药物中的应用

说明书

本发明涉及VP53B和VP110抗体及其在制备防治对虾白斑综合征的药物中的应用。本发明筛选得到VP53B和VP110部分蛋白片段，生产了多克隆抗体，采用对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白抗体中和实验证实了VP53B和VP110的多克隆抗体可以显著抑制WSSV病毒的经口侵染能力，尤其VP53B的多克隆抗体保护率高达85％。此外，两种多克隆抗体具有协同效应。本发明为防治对虾白斑综合征提供了一种新的药物，可有效预防WSSV的感染和传播。

技术领域

本发明涉及水产养殖的疾病防治领域，具体地说，涉及VP53B和VP110抗体及其在制备防治对虾白斑综合征的药物中的应用。

背景技术

对虾白斑综合征是一种在对虾养殖业较为常见的爆发性流行性疾病，其具有传播宿主广、致死速度快、致死率高等特点。对虾白斑综合征病毒(White Spot SyndromeVirus，WSSV)为导致对虾白斑综合征的病原体病毒。宿主范围具体包括对虾、螯虾等在内的大约98种甲壳类动物。宿主感染WSSV后的症状包括：食欲减退，常浮于水面，部分宿主体表出现白斑，附肢无力，肝胰腺褪色等现象。WSSV感染对虾后，可导致对虾在三到七天内死亡，且死亡率接近100％。

对虾白斑综合征给世界的虾养殖业造成了巨大的损失。自上世纪九十年代初在中国爆发以来，对虾白斑综合征陆续在亚洲、美洲、欧洲等国相继爆发。相关统计数据显示，由于对虾白斑综合征的爆发所造成的经济损失已经达到80-150亿美元，并且该损失以每年10亿美元的速度递增，占到世界虾养殖年产量的十分之一。然而，迄今为止，依然没有相对有效的方法去防治WSSV。

随着对于WSSV研究的深入，人们对于WSSV的了解也逐步加深。目前关于WSSV病毒的病毒结构、病毒宿主范围、病毒分类都有了较为深入的了解。

WSSV病毒粒子的结构特征及其分类：WSSV病毒粒子呈长杆状，无包涵体，尾部有类似鞭毛的附着结构，该结构的功能尚不清楚。病毒颗粒长约250nm-330nm，宽约80-120nm，为双链DNA病毒。其病毒粒子的结构从外至内共有三部分，包括三层囊膜结构、桥连结构和核衣壳结构。由于WSSV颗粒形状与杆状病毒类似，所以最初认为其属于杆状病毒(Baculoviridae)。后来，国际病毒分类委员会将其划分为Nimaviridae科Whispovirus属的唯一种。Whispovirus属是一种新划分的病毒属，随着对病毒分类研究的深入，将可能会有越来越多的病毒划分到该属，其潜在病毒种包括B病毒、B1病毒、Tau病毒、Baculo-A病毒和Baculo-B病毒。

WSSV囊膜蛋白在病毒侵染中的作用研究进展：WSSV的结构蛋白根据其在病毒位置的不同，通常划分三种蛋白，即囊膜蛋白、桥连蛋白和核衣壳蛋白。一般认为，病毒的囊膜蛋白由于能够直接作用于受体相关细胞而在病毒的感染过程中往往起到了相当重要的作用。因此，对于WSSV囊膜蛋白的研究已成为WSSV研究领域的热点。目前已经鉴定的WSSV囊膜蛋白共33以上，包括VP12B、VP13B、VP14、VP19、VP28、VP31、VP32、VP33、VP37、VP38A、VP39B、VP41A、VP41B、VP51A、VP51B、VP53A、VP53B、VP60A、VP68、VP90、VP110、VP124、VP180、VP187、VP281和VP466等。其中，VP28在WSSV囊膜蛋白中含量大约60％，是WSSV的主要囊膜蛋白。相对而言，对于VP28蛋白的功能性研究也较为深入。其次研究较多的为VP14、VP19和VP37。