[发明专利]猪瘟病毒截短E2蛋白及其应用

说明书

本发明公开了一种基于蛋白空间结构设计的猪瘟病毒截短E2蛋白及其应用。本发明根据牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的晶体结构，模拟出猪瘟病毒E2蛋白的空间结构并对其进行截短表达，截短蛋白E2^B/C/D/A的氨基酸序列为SEQ ID NO：1所示，其保留了E2蛋白完整的抗原性、且与牛病毒性腹泻病毒抗体无交叉反应。本发明进一步构建了稳定表达截短蛋白E2^B/C/D/A的CHO细胞系，其微生物保藏编号为CGMCC No.14722。本发明还公开了一种用于猪瘟病毒抗体检测的间接ELISA试剂盒，其中包被抗原为猪瘟病毒截短蛋白E2^B/C/D/A，该试剂盒能够特异性检测猪瘟病毒抗体，特异性、敏感性和重复性好。

技术领域

本发明涉及猪瘟病毒截短E2蛋白，还涉及猪瘟病毒截短E2蛋白在检测猪瘟病毒抗体中的应用，属于猪瘟病毒E2蛋白的截短表达及应用领域。

背景技术

猪瘟(classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(classical swine fevervirus,CSFV)引起的一种严重危害全球养猪业的高度传染性疾病。CSFV属于黄病毒科、瘟病毒属成员。瘟病毒属的其它成员包括牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)和边界病病毒(border disease virus,BDV)。BVDV不仅可以感染牛，也可以感染猪。CSFV是有囊膜的单股正链RNA病毒，基因组全长12.3kb。基因组包含一个大的开放阅读框，编码一个约3,900个氨基酸组成的多聚蛋白，该多聚蛋白在病毒自身及宿主蛋白酶的作用下加工水解产生4种结构蛋白(C、E^rns、E1和E2)和8种非结构蛋白(N^pro、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)(Meyers G,Thiel HJ.Molecular characterization ofpestiviruses.Adv Virus Res.1996,47:53–118.)。