[发明专利]一种中华鳖细菌性腮腺炎病原菌的LAMP检测试剂盒及检测引物有效
| 申请号： | 201711121942.5 | 申请日： | 2017-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN108950024B | 公开（公告）日： | 2022-04-01 |
| 发明（设计）人： | 林锋;刘莉;曹铮;陈建明;卢淑娟;孙丽慧 | 申请（专利权）人： | 浙江省淡水水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/085 |
| 代理公司： | 杭州知见专利代理有限公司 33295 | 代理人： | 赵越剑 |
| 地址： | 313001 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 中华 细菌性 腮腺炎 病原菌 lamp 检测 试剂盒 引物 | ||
1.一种中华鳖细菌性腮腺炎病原菌的LAMP检测试剂盒，包括特异性引物、反应缓冲液、Bst DNA聚合酶及荧光染料，其特征在于，所述特异性引物由外引物、内引物及环引物组成：
外引物：
BacLAMP-F3: AGGTATATGGGAATATAGCAACA
BacLAMP-B3: GCTTCTTTTAATGTTACATCTGGTT；
内引物：
BacLAMP-FIP: TCTTGGATTTGAGGTAACACATCACTTTTATTTTGAAAATGGAAGAGTGAGGBacLAMP-BIP: CGCACGTATCATTTTTAATGGGGTTTTTTTCTAGCGGATCATTAGGATC；
环引物：
BacLAMP-LF: CCAGTTCGAGCCTGTATCCAC
BacLAMP-LR: TAGAGAGACGTATAGCTGCGG；
所述荧光染料为钙黄绿素；
特异性引物、反应缓冲液、Bst DNA聚合酶及荧光染料组成的扩增反应液20μL中各组分组成如下：
1.6mM BacLAMP-FIP，1.6mM BacLAMP-BIP，0.2mM BacLAMP-F3和BacLAMP-B3，0.2mMBacLAMP-LF，0.2mM BacLAMP-LR，20mM Tris-HCl，10mM氯化钾，15mM硫酸铵，16mM 硫酸镁，0.1% Triton X-100，0.6M 甜菜碱，1.6mM dNTP，8U Bst DNA聚合酶，1.25mM 钙黄绿素，25mM MnCl2；
所述Tris-HCl的pH为8.0～9.0。
2.一种检测中华鳖细菌性腮腺炎病原菌的LAMP扩增引物，其特征在于，所述LAMP扩增引物由外引物、内引物及环引物组成：
外引物：
BacLAMP-F3: AGGTATATGGGAATATAGCAACA
BacLAMP-B3: GCTTCTTTTAATGTTACATCTGGTT；
内引物：
BacLAMP-FIP: TCTTGGATTTGAGGTAACACATCACTTTTATTTTGAAAATGGAAGAGTGAGGBacLAMP-BIP: CGCACGTATCATTTTTAATGGGGTTTTTTTCTAGCGGATCATTAGGATC；
环引物：
BacLAMP-LF: CCAGTTCGAGCCTGTATCCAC
BacLAMP-LR: TAGAGAGACGTATAGCTGCGG。
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