[发明专利]一种天花粉的组织培养快繁技术在审
申请号: | 201711123273.5 | 申请日: | 2017-11-14 |
公开(公告)号: | CN107593461A | 公开(公告)日: | 2018-01-19 |
发明(设计)人: | 李正美 | 申请(专利权)人: | 李正美 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 玉林市振盛专利商标代理事务所45109 | 代理人: | 卢翔飞 |
地址: | 537000 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 天花粉 组织培养 技术 | ||
1.一种天花粉的组织培养快繁技术,其特征在于包括以下工艺步骤:
(1)外植体的处理:选取健壮天花粉植株上切取带腋芽的茎段作为外植体,剪去叶片,切成7.0长的带有4个腋芽的节段先用洗衣粉水冲洗4.5h,再用毛轻刷洗外植体表面将其表面的尘土和部分菌体去除,然后用自来水冲洗4.5h后置于超净工作台中,先用75%乙醇消毒34s后用无菌水洗7次,再用0.1%升汞溶液消毒13min,用无菌水冲洗9次再用无菌滤纸擦干表面的水珠后备用;
(2)丛生芽导:将步骤(1)处理后的带腋芽茎段切成4cm小段并接种到诱导培养基上,先在25℃条件下全暗培养7天,然后每天光照14小时,光照强度为3400lx,直至诱导形成丛生芽;
(3)增殖培养:将步骤(2)培养获得的嫩芽长至约4cm时切离并转入增殖培养基上进行继代培养,接种后先在25℃条件下全暗培养6天,然后每天光照19小时,光照强度为5200lx,置于培养温度为25℃的条件下培养,多次反复切割进行继代培养,以得到更多的丛生芽;
(4)生根培养:当步骤(2)或(3)的丛生芽长至5cm高时,将丛生芽切割成单苗接种至生根培养基中进行生根培养,接种后先在25℃条件下全暗培养6天,然后置于每天光照19小时,光照强度为3400lx,培养温度为25℃的条件下培养直至长出根;
(5)试管苗移栽:当小苗长出的新根系长达5cm左右时,并且长出侧根,苗高7cm以上时,将培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗9天后,将试管苗从培养瓶中取出,洗掉根部培养基,尽量不伤害根部,栽入经灭菌过的蛭石中。
2. 根据权利要求1所述的一种天花粉的组织培养快繁技术,其特征在于步骤(2)所述的诱导培养基为:MS+ 5mg/L NAA+ 4mg/L 6-BA+ 3mg/L KT+5%蔗糖+0.8%琼脂+0.3%活性炭,pH值为5.8。
3. 根据权利要求1所述的一种天花粉的组织培养快繁技术,其特征在于步骤(3)所述的增殖培养基为:MS+5.0mg/L 6-BA+2.3mg/L NAA+5%蔗糖+0.8%琼脂+0.3%活性炭,pH值为5.8。
4. 根据权利要求1所述的一种天花粉的组织培养快繁技术,其特征在于步骤(5)所述的生根培养基为:MS+15mg/L KH2PO4+4.0%蔗糖+0.9%琼脂+0.2%活性炭,pH值为5.8。
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