[发明专利]一种重组酵母菌株以及微生物混菌产电的方法

权利要求书

1.一种重组酿酒酵母菌株，其特征在于，所述重组酵母菌株的PDC1、PDC5、PDC6、ADHI、ADH4基因被敲除，并插入LDH、XR、XDH和XKS基因；所述LDH基因来源于牛，所述XDH、XR和XKS核苷酸序列依次如SEQ ID NO:1-3所示。

2.根据权利要求1所述重组酿酒酵母菌株，其特征在于，所述重组酿酒酵母菌株以酿酒酵母BY4741为出发菌株。

3.权利要求1-2任意一项所述重组酿酒酵母菌株在和希瓦氏菌联合MFC产电或制备MFC中的应用。

4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述希瓦氏菌为希瓦氏菌MR-1和/或希瓦氏菌3C5。

5.一种混菌体系MFC产电的方法，其特征在于，包括：

步骤1、活化希瓦氏菌以及权利要求1-2任意一项所述重组酿酒酵母菌株；

步骤2、将所述重组酿酒酵母菌株以及希瓦氏菌倒入阳极液中采用双室MFC产电；

其中，所述阳极液由36.7g氨基酸混合物/l、6.7g/l YNB、0.02g/l His、0.02g/l Trp、0.1g/l Leu、M9缓冲液、0.4g/l葡萄糖和0.6g/l木糖组成；所述氨基酸混合物由以下组分组成：

0.5g腺嘌呤、2.0g丙氨酸、2.0g精氨酸、2.0g天冬酰胺、2.0g天冬氨酸、2.0g半胱氨酸、2.0g谷酰胺、2.0g赖氨酸、2.0g甲硫氨酸、0.2g对氨基苯甲酸、2.0g苯丙氨酸、2.0g脯氨酸、2.0g丝氨酸、2.0g谷氨酸、2.0g甘氨酸、2.0g肌醇、2.0g异亮氨酸、2.0g苏氨酸、2.0g酪氨酸和2.0g缬氨酸。

6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，步骤1为：

将希瓦氏菌在LB培养基里30℃，200rpm，过夜培养；过夜培养液按1:100比例转接入新的LB培养基里30℃，200rpm，培养10小时；

重组酿酒酵母转接到YPD培养基中，30℃，200rpm，培养48小时，1ml培养液转接入新的100mlYPD中，30℃，200rpm，培养36小时。

7.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述重组酿酒酵母菌株以及希瓦氏菌在阳极液中的OD₆₀₀值均为0.6。

8.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述双室MFC的阴极液由50mM铁氰化钾、50mM磷酸氢二钾、50mM磷酸二氢钾和余量水组成。

9.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述双室MFC各参数如下：

阳极碳布电极大小为2.5cm×2.5cm，阴极碳布电极大小为2.5cm×3cm，双室之间用1M盐酸过夜浸泡的质子交换膜隔开，MFC放在30℃培养箱中，阴阳两极连接2KΩ的外电阻，阳极液充氮气赶走MFC中氧气。