[发明专利]一种东洋芽孢杆菌菌株以及菌剂制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种东洋芽孢杆菌菌株以及菌剂制备方法和应用，东洋芽孢杆菌（Bacillus toyonensis）SB3018，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2014年11月21日，保藏编号：CGMCC No.10033，所述东洋芽孢杆菌属于真细菌界，后壁菌门，杆菌纲，芽孢杆菌科，芽孢杆菌属。所述的东洋芽孢杆菌（Bacillus toyonensis）SB3018的菌剂，是以所述的东洋芽孢杆菌（Bacillus toyonensis）SB3018经斜面培养、种子培养和发酵制备得到的菌剂。制备方法包括斜面培养、种子培养、发酵和菌剂制备步骤；应用为所述的东洋芽孢杆菌（Bacillus toyonensis）SB3018的菌剂用于制备防治烟草根结线虫病和烟草黑胫病药物中的应用。所述东洋芽孢杆菌为活性成分的制剂对烟草根结线虫具有显著的毒杀作用。

技术领域

本发明属于微生物分离培养技术领域，具体涉及一种东洋芽孢杆菌菌株以及菌剂制备方法和应用。

背景技术

烟草是重要的经济作物，其生长过程受到很多病害的危害，其中烟草根结线虫病和黑胫病是两种重要的土传病害，造成烟草的减产或绝收。根结线虫(Meloidogyne spp.)是一类植物内寄生线虫，无严格的宿主特异性，能侵染多种农作物，严重危害农业生产，每年造成全球约1000亿美元的损失。其在全世界广泛分布，寄主范围广泛，它能使细菌和真菌更易于侵染植物，是诱发植物病害的重要原因之一。随着烟草生产的发展，连作面积的增加，线虫病危害日趋严重，是许多国家烟草生产的主要限制因素之一，在我国各大烟区造成了严重危害。烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var. nicotianae)是一种兼性寄生菌，会诱发烟草黑胫病(Tobacco Black Shank)，对烟草具有毁灭性危害。烟草作为其寄主植物，在其团棵期到旺长期间发病达到高峰期，主要危害烟株根部和茎基部。另外，土地多年连作、与烟草青枯病、根结线虫病混合发生，将加重危害烟株健康，导致烟叶减产和烟叶质量降低。

烟草黑胫病和根结线虫病的防治目前多采用化学防治、轮作及抗病品种，但效果均不太理想，且存在诸多弊端。如目前使用的化学杀线虫剂多为剧毒或高毒、高残留农药，对土壤微生物、植物、水源和大气层带来严重污染或破坏，同时病菌和线虫抗药性问题也日益突出，而且药物在植物体内残留会间接对人类造成危害。因此急需开发对环境友好，对人畜无毒的防治线虫病害的微生物制剂。

植物寄生线虫生防细菌的研究是利用环境中的拮抗细菌来防治植物病虫害的有效途径，也是最近几年兴起的新的研究热点，而筛选高效和活性稳定的拮抗菌株则是保证生物防治获得成功的先决条件。目前主要研究的生防细菌有植物根围促生细菌（PGPR）、穿刺巴氏杆菌（Pasteuria penetrans）、假单孢杆菌（Pseudomonas spp.）、苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）。同时，烟草黑胫病的生物防治资源也十分丰富，研究发现许多芽孢杆菌作为拮抗菌对烟草黑胫病具有良好的防治效果。国内外众多研究表明，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)等通过抗生、溶菌、竞争、重寄生等作用机制对烟草黑胫病具有良好的防治效果。

但是据可查资料，能够同时具备防治烟草黑胫病和根结线虫病功能的东洋芽孢杆菌及其制剂的制备和利用一直未见报道，本发明为防治烟草中的这两种病害提供生防资源和方法。

发明内容