[发明专利]表达载体组织、新的生产用细胞产生方法及其在重组产生多肽中的用途在审
申请号: | 201711133954.X | 申请日: | 2012-12-19 |
公开(公告)号: | CN107881196A | 公开(公告)日: | 2018-04-06 |
发明(设计)人: | P·M·许尔斯曼;H·克内根 | 申请(专利权)人: | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/13;C07K16/00;C07K16/28 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所11247 | 代理人: | 凌立,黄革生 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 表达 载体 组织 生产 细胞 产生 方法 及其 重组 多肽 中的 用途 | ||
1.表达载体,其包含:
-抗体轻链表达盒,
-抗体重链表达盒,和
-选择标记表达盒,
其中该表达盒单向排列,和
其中该表达盒按抗体重链表达盒、抗体轻链表达盒和选择标记表达盒的5’至3’顺序排列。
2.权利要求1的表达载体,其特征在于所述抗体轻链表达盒和/或所述抗体重链表达盒和/或所述选择标记表达盒相互独立地包含选自人延伸因子1α启动子、人CMV启动子和SV40启动子的启动子。
3.权利要求1或2的表达载体,其特征在于一个、两个或全部三个表达盒包含人延伸因子1α启动子。
4.权利要求1-3任一项的表达载体,其特征在于所述抗体轻链表达盒和/或所述抗体重链表达盒和/或所述选择标记盒相互独立地包含人延伸因子1α启动子。
5.权利要求1-4任一项的表达载体,其特征在于所述表达盒不包含终止子序列。
6.权利要求5的表达载体,其特征在于所述终止子序列是人胃泌素基因转录终止子序列(hGT)。
7.权利要求1或2的表达载体,其特征在于一个、两个或全部三个表达盒包含人CMV启动子。
8.权利要求1、2和7任一项的表达载体,其特征在于所述抗体轻链表达盒和/或所述抗体重链表达盒和/或所述选择标记盒相互独立地包含人CMV启动子。
9.权利要求1-4和7-8任一项的表达载体,其特征在于一个、两个或全部三个表达盒包含牛生长激素polyA信号序列。
10.权利要求1-4和7-9任一项的表达载体,其特征在于所述抗体轻链表达盒和/或所述抗体重链表达盒和/或所述选择标记盒相互独立地包含牛生长激素polyA信号序列。
11.权利要求1-4和7-10任一项的表达载体,其特征在于所述抗体轻链表达盒和/或所述抗体重链表达盒和/或所述选择标记盒相互独立地包含选自牛生长激素polyA信号序列和SV40polyA信号序列的polyA信号序列。
12.权利要求1和7-11任一项的表达载体,其特征在于一个、两个或全部三个表达盒在所述polyA信号序列后面包含人胃泌素终止子序列。
13.权利要求1和7-12任一项的表达载体,其特征在于所述抗体轻链表达盒和/或所述抗体重链表达盒和/或所述选择标记盒相互独立地在polyA信号序列后面包含人胃泌素终止子序列。
14.权利要求1和7-13任一项的表达载体,其特征在于所述抗体轻链表达盒和/或所述抗体重链表达盒和/或所述选择标记盒相互独立地按5’至3’方向包含牛生长激素polyA信号序列和人胃泌素终止子序列。
15.权利要求1-14任一项的表达载体,其特征在于一个、两个或全部三个表达盒的启动子包含内含子A。
16.权利要求1-8和12-13任一项的表达载体,其特征在于一个、两个或全部三个表达盒包含SV40polyA信号序列。
17.权利要求16的表达载体,其特征在于一个、两个或全部三个表达盒包含SV40启动子。
18.权利要求1-17任一项的表达载体,其特征在于编码抗体轻链的核酸和/或编码抗体重链的核酸包含至少一个内含子。
19.权利要求1-18任一项的表达载体,其特征在于编码抗体轻链的核酸和/或编码抗体重链的核酸是cDNA。
20.权利要求1-19任一项的表达载体在重组产生抗体中的用途。
21.权利要求1-19任一项的表达载体在产生稳定细胞系中的用途。
22.权利要求1-19任一项的表达载体在产生生产细胞系中的用途。
23.权利要求1-19任一项的表达载体在产生稳定细胞系中的用途,所述表达载体包含至少一个含有人延伸因子1α启动子的表达盒。
24.权利要求1-19任一项的表达载体在产生生产细胞系中的用途,所述表达载体包含至少一个含有人延伸因子1α启动子的表达盒。
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