[发明专利]一种高纯聚肌胞冻干制剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种高纯聚肌胞冻干制剂及其制备方法。涉及领域为冻干制剂及其制备方法。本发明的技术方案是：一种高纯聚肌胞冻干制剂及其制备方法，包括聚肌胞原液及冷冻干燥添加剂，所述冷冻干燥添加剂基本上由地塞米松、维生素C钠、氨基酸、硫酸卡那辛组成。制备上述新型凝胶免疫佐剂的方法，包括以下步骤：(1)聚肌胞原液制备；(2)聚肌胞原液过滤、浓缩；(3)加入冷冻干燥添加剂混匀，无菌过滤，分装于西林瓶中；(4)将西林瓶放入冷冻干燥器内，分别在5℃、0℃、‑6℃备平衡1小时；快速冻结，将制品温度降至‑50℃维持3小时；(5)真空干燥；(6)加热干燥，在制品温度达到30℃条件下持续3小时；(7)加塞，封口。

技术领域

本发明涉及一种高纯聚肌胞冻干制剂及其制备方法。

背景技术

聚肌胞(PolyIC或PIC)是由人工合成的聚肌苷酸(PolyI)和聚胞苷酸(PolyC)配对合成的双链核苷酸(RNA)，是一种高效干扰素诱生剂。目前酶法合成的核苷酸原料均为酵母提取物，含有大量的内毒素、残留DNA及菌体蛋白，这些物质都能够导致PIC产品在临床中产生发热等副作用。我公司进行了精制聚肌胞的纯化与合成工艺探索。精制聚肌胞是在原聚肌胞制备工艺的基础上通过三步层析技术进行精制，最大限度地去除内毒素、残留DNA及残余宿主菌体蛋白等杂质，从而大大地提高了纯度和有效成分的含量，远远高于原聚肌胞注射液的纯度；该精制聚肌胞制备是在-40℃冷冻干燥的，低温可以最大限度地保持了有效成分及其活性。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种高纯聚肌胞冻干制剂及其制备方法，目的之二是提供一种高纯聚肌胞冻干制剂。

一种高纯聚肌胞冻干制剂及其制备方法，包括聚肌胞原液及冷冻干燥添加剂，所述冷冻干燥添加剂基本上由葡萄糖酸钙和地塞米松组成。为了更好地维持和保护原液生物的活性，所述冷冻干燥添加剂中还含有维生素C钠、氨基酸。所述冷冻干燥添加剂各组分的百分比为：

硫酸卡那辛500～5000单位/ml

氨基酸 0.5％～2.0％

维生素C钠 0.1％～0.3％

地塞米松 2.0％～8.0％

一种高纯聚肌胞冻干制剂及其制备方法，包括以下步骤：

(1)聚肌胞原液制备：取聚肌苷酸和聚胞苷酸纯化液，于40℃～60℃水浴中混合搅拌30min～120min，聚肌苷酸和聚胞苷酸纯化液加入比例为1∶0.5～1∶1.5；

(2)将聚肌胞原液用0.45μm滤芯过滤，用Millipore超滤系统300KD的膜包浓缩成浓度为0.8mg/ml～4.0mg/ml，加入冷冻干燥添加剂混匀，无菌过滤，分装于西林瓶中，半加塞，其中所述冷冻干燥添加剂基本上由葡萄糖酸钙、地塞米松组成；

(3)待西林瓶放入冷冻干燥器内，分别在4.8～5.2℃、0.2～-0.2℃、-5.8～-6.2℃各平衡1小时；

(4)快速冻结，将制品温度降至-48～-52℃维持3.5～2.5小时；

(5)真空干燥；

(6)加热干燥，在制品温度达到25.5～37.5℃条件下持续3.5～2.5小时；

(7)全部加塞，压封铝盖。

本发明由于采用了上述技术方案，因此具有以下优点：

1.在冻干制剂的减压一升温一干燥过程中，适宜的升温程序对维持生物制品的生物活性、制剂的外观形态是重要的。将升温干燥的终点控制在30℃并持续3小时，使制品中的残余水分以定量非共价键形式存在，以维持原液的形态、活性的稳定，减少成品冻干制剂在保存过程中的效价急速回落，并延长保存时间。