[发明专利]一种调节机体免疫力抗癌生物制剂

说明书

本发明提供了一种调节机体免疫力抗癌生物制剂，该生物制品是由鸡胚接种单链RNA病毒之后，收取的尿囊液经过超滤浓缩后，再进行纯化，得到纯化的单链RNA病毒液；浓缩后超滤膜膜下尿囊液再经过浓缩超滤，得到膜下有效成分；将纯化后单链RNA病毒和膜下有效成分混合、除菌过滤后获得该生物制品；所述生物制品病毒纯度高，而病毒中卵清蛋白等杂蛋白少，大大减小了该制剂对人体的副作用；同时单链RNA病毒和膜下有效成分具有协同抗癌效果，从而大大提高了该生物制品的抗肿瘤作用；所述制备方法有效提高病毒纯度，减少病毒中卵清蛋白等杂蛋白，制备方法简单，大大降低了生产成本，适合规模化工业生产的需要。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，尤其是一种调节机体免疫力抗癌生物制剂。

背景技术

单链RNA病毒(如鸡新城疫病毒NDV、仙台病毒等)能改变肿瘤细胞的免疫原性，增强免疫细胞识别肿瘤细胞和杀伤肿瘤细胞的能力，提高机体免疫监视功能，促进机体的排斥肿瘤反应，在人类肿瘤性疾病生物防控中具有较高的研究和应用价值。到目前为止，用鸡新城疫病毒治疗的肿瘤包括全身多种恶性肿瘤，其中人类肿瘤有消化道肿瘤(包括胃癌、结、直肠癌等)、恶性黑色素瘤、肾细胞癌、神经纤维瘤、纤维肉瘤、鼻咽癌、前列腺癌、膀胱移行细胞癌、乳腺癌、头颈部肿瘤、肝癌等。鸡新城疫病毒抗肿瘤、抗病毒作用机制的研究较多，主要有如下几个方面：1.鸡新城疫病毒对肿瘤细胞的直接、特异性杀伤作用；2.鸡新城疫病毒的非特异性免疫刺激作用，NDV感染肿瘤细胞后，诱导机体产生的细胞因子、趋化因子和其它基因产物可达12种以上；3.鸡新城疫病毒可诱导肿瘤细胞凋亡。

仙台病毒的抗肿瘤、抗病毒机制有如下三种：1.仙台病毒对肿瘤细胞的直接毒性作用，现已发现很多病毒能直接杀死肿瘤细胞，生物学家正努力寻找特异性杀伤肿瘤细胞而对正常细胞投有′毒性″的病毒，而分裂异常旺盛的肿瘤细胞是仙台病毒的理想宿主；2.免疫性溶解肿瘤细胞的作用，仙台病毒能使细胞表面病毒粒子发芽引起肿瘤细胞膜免疫原性增加，这样机体产生的免疫反应不仅针对病毒而且包括病毒所寄生的肿瘤细胞，这一机制在病毒抗肿瘤、抗病毒中起重要作用；3.干扰作用，人类的许多肿瘤发生与病毒的感染有密切联系，当机体或肿瘤细胞感染仙台病毒时，就会产生IFN(干扰素)，干扰肿瘤病毒，并抑制肿瘤细胞的生长。

因此，通过提高病毒纯度，减少病毒中卵清蛋白等杂蛋白，制备出对人体副作用少而抗癌作用显著的制剂，具有非常重要的应用价值和经济价值。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种生物制品。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述生物制品的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种调节机体免疫力抗癌生物制剂，是由下述方法得到的：鸡胚接种单链RNA病毒之后，收取的尿囊液经过超滤浓缩后，再进行纯化，得到纯化的单链RNA病毒液；浓缩后超滤膜膜下尿囊液再经过浓缩超滤，得到膜下有效成分；将纯化后单链RNA病毒和膜下有效成分混合、除菌过滤后获得该生物制品。

优选的，上述生物制品，是由下述方法得到的：

(1)病毒接种：

画出气室和接种部位，无菌条件下在鸡胚的接种部位打个小孔，取单链RNA病毒液0.2ml注入鸡胚内并用石蜡封口，于37℃培养96～130小时；

(2)收获尿囊液：

无菌条件下对步骤(1)培养后的鸡胚进行消毒后敲碎蛋壳，扒开囊膜后用无菌吸管吸取尿囊液，并将收获完的尿囊液进行收集、测效价；

(3)首次超滤浓缩：

无菌环境下通过超滤系统对步骤(2)的尿囊液超滤浓缩，其中超滤膜包截留分子量为300Kd；

(4)纯化：