[发明专利]黑骨藤有效组分及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物技术领域，特别是涉及黑骨藤有效组分及其制备方法和应用。

技术背景

类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis，RA)是一种主要以持续关节组织滑膜增生、软骨侵蚀、关节损坏等为主要特征的累及多关节的系统性疾病，若不及时治疗，病情将逐渐发展加重，最终可致不同程度上的残废，严重影响患者的生活质量；在临床RA的治疗过程中，化学药物不断出现耐药性、毒副作用等问题，人们把注意力转向了中药，从有效抗炎的中药中找寻到真正发挥药效的化学成分并将其开发成疗效突出的抗炎新药，已成为现如今药物研发的重要方向。

黑骨藤为萝藦科杠柳属植物黑龙骨Periploca forrestii Schltr.的干燥根或全株，有通经，活血和祛风等功效，用于风湿关节痛，跌打损伤等症，收载于《贵州省中药材、民族药材质量标准》2003年版；是贵州少数民族用药，有舒筋活血、祛风除湿、清热解毒等作用，对于由风湿、类风湿所引起的软组织无菌性炎症同样具有较强的消肿止痛作用。目前已开发应用的黑骨藤复方制剂主要有黑骨藤追风活络胶囊、黑骨藤追风活络颗粒、黑骨藤透骨喷雾剂、黑骨藤伸筋透骨液、黑骨藤伤湿贴等。已研究报道的化学成分有强心苷类、C21甾类、三萜类、蒽醌类、黄酮类、苯丙素类、挥发油、低聚糖、脂肪醇等。

因此，从黑骨藤中制备得到抗类风湿性关节炎有效组分具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种黑骨藤有效组分及其制备方法和应用，以期从黑骨藤这种民族药材中找到有效抗炎的化学组分并将其开发成疗效突出的抗炎新药从而能够在诸如风湿性关节炎这类病症中得到应用。

本发明的技术方案包括：

首先，本发明的这种黑骨藤有效组分，制备时通过乙醇为提取溶剂，以回流提取为提取方法制备黑骨藤药材总提取物，然后将黑骨藤的总提取物进行D₁₀₁大孔树脂柱层析，依次采用水和不同浓度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，得到各洗脱部位；本发明得到的该有效组分为30％乙醇溶液洗脱部位。

这种黑骨藤有效组分的制备方法，包括如下步骤：

步骤1：用乙醇水溶液作为提取溶剂通过回流提取的方法进行提取制备黑骨藤药材的总提取物；

步骤2：将黑骨藤药材的总提取物浓缩至无醇味后，得浸膏，浸膏加适量水稀释，调节其PH为5，过滤，取滤液；

步骤3：将滤液经大孔树脂柱层析，用水、乙醇进行洗脱，弃去水洗脱液，收集乙醇洗脱液浓缩干燥，得到黑骨藤有效组分。

优选的，所述乙醇水溶液提取次数为1～4次，每次乙醇水溶液提取时间为0.5～3小时，每次提取时加入乙醇水溶液的体积为黑骨藤重量的4～10倍。特别优选的，乙醇水溶液提取次数为3次，每次乙醇水溶液提取的时间为1.5小时，每次提取时加入乙醇水溶液的体积是黑骨藤重量的4倍、6倍、8倍或10倍。

优选的，所述乙醇水溶液的质量百分浓度为50％；

优选的，所述加水稀释时加入水的体积为所述黑骨藤药材重量的6倍。

本发明还提出了这种黑骨藤有效组分在制备抗类风湿性关节炎的药物中的应用。

与现有技术相比，

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：本发明通过以质量百分比浓度为50％的乙醇为提取溶剂，以回流提取为提取方法制备黑骨藤药材总提取物，然后将黑骨藤的总提取物进行D₁₀₁大孔树脂柱层析，依次采用水和不同浓度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，得到各洗脱部位；采用大鼠佐剂性关节炎、毛细血管通透性测定实验，进行抗炎活性筛选，确定30％乙醇溶液洗脱部位具有较好的抗炎效果，可用于治疗类风湿性关节炎等疾病。同时对水和不同浓度的乙醇洗脱部分进行了HPLC(UV/ELSD)指纹图谱的测试，结果表明黑骨藤主要成分分布在30％乙醇洗脱部分，与药效实验结果一致，说明黑骨藤的30％乙醇洗脱部分的化学成分为其主要药效活性成分。可用于抗类风湿性关节炎药物的制备。

附图说明

图1是本发明的黑骨藤有效组分的制备流程图；

图2是实施例1的黑骨藤各组分的制备流程图；

图3是实施例1的黑骨藤有效组分HPLC-UV(325nm)色谱图；

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的任何限制。

实施例1：

(一)组分制备：