[发明专利]苹果矮化砧木M9的组培快繁的方法在审
| 申请号： | 201711153743.2 | 申请日： | 2017-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN108077073A | 公开（公告）日： | 2018-05-29 |
| 发明（设计）人： | 王瑞霞 | 申请（专利权）人： | 颐正源（天津）科技有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京中企鸿阳知识产权代理事务所(普通合伙) 11487 | 代理人： | 郭鸿雁 |
| 地址： | 300000*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 砧木 组培快繁 矮化 苹果 无病毒苗 分化率 成活率 繁殖 农业技术领域 组织培养技术 继代培养 生根培养 无菌体系 愈伤组织 植物再生 周年生产 外植体 驯化 出瓶 采集 | ||
1.一种苹果矮化砧木M9的组培快繁的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：
(1)外植体的采集；(2)无菌体系的建立；(3)愈伤组织形成；(4)继代培养；(5)生根培养；(6)驯化出瓶。
2.根据权利要求1所述的苹果矮化砧木M9的组培快繁的方法，其特征在于：所述步骤(1)按以下步骤进行：在3月～5月，采集叶芽饱满的当年生枝条，用75％的酒精擦拭茎秆，然后剥掉外皮，剪成小段，每段保留两个芽，即为采集得到的外植体。
3.根据权利要求2所述的苹果矮化砧木M9的组培快繁的方法，其特征在于：所述步骤(2)按以下步骤进行：取步骤(1)得到的外植体，先用75％的酒精浸泡20秒，再用0.1％的氯化汞浸泡10分钟，然后用无菌水冲洗8遍，得到消毒彻底的外植体。
4.根据权利要求3所述的苹果矮化砧木M9的组培快繁的方法，其特征在于：所述步骤(3)按以下步骤进行：将步骤(2)消毒彻底的外植体放入启动培养基中培养产生愈伤组织；所述启动培养基为：MS+6-BA0.8PPM+IBA 0.4PPM+KT 0.7PPM，蔗糖25g/L，pH值为6.2。
5.根据权利要求4所述的苹果矮化砧木M9的组培快繁的方法，其特征在于：所述步骤(4)按以下步骤进行：将步骤(3)产生愈伤组织的芽，转入到分化培养基中进行继代培养，培养至每个芽体分化形成3-5个芽；所述分化培养基为：MS+6-BA 0.4PPM+IBA 0.2PPM+KT0.3PPM，蔗糖25g/L，pH值为6.4。
6.根据权利要求5所述的苹果矮化砧木M9的组培快繁的方法，其特征在于：所述步骤(5)按以下步骤进行：将步骤(4)分化培养得到的芽转入到生根培养基中进行生根培养，得到生好根的瓶苗；所述生根培养基为：WPM+IBA0.5PPM，蔗糖25g/L，pH值为6.4。
7.根据权利要求6所述的苹果矮化砧木M9的组培快繁的方法，其特征在于：所述步骤(6)按以下步骤进行：将步骤(5)生好根的瓶苗移至驯化室内，在光照5000LUX的条件下，驯化一周，然后打开瓶盖驯化一天，取出用清水冲洗干净，用多菌灵1500倍稀释液蘸根，晾干栽到穴盘中；在穴盘内生长两个月后，即完成本发明苹果矮化砧木M9的组培快繁。
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