[发明专利]一种去甲基雏叶龙胆酮与雏叶龙胆酮的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然药化邻域，具体为一种去甲基雏叶龙胆酮与雏叶龙胆酮的制备方法。

背景技术

去甲基雏叶龙胆酮(Tetrahydroxyxanthon)分子式C13H8O6，分子量260.2，CAS号2980-32-7，为黄色粉末，易溶于易溶于甲醇，乙腈等有机溶剂，雏叶龙胆酮(bellidifolin，1，5，8-trihydroxy-3-methoxyxanthone)分子式为C14H10O6，分子量为274.22，CAS号为2798-25-6，为黄绿色粉末，此二者为酮类化合物主要存在于龙胆科獐牙菜属、假龙胆属、龙胆属植物中。其结构式如下

由于具有酮结构的化合物都能够与不同类型的药物靶标相互作用，因此这类结构也曾被描述为“特权结构”。去甲基雏叶龙胆酮与雏叶龙胆酮作为一种天然四氧代酮类化合物在许多方面亦表现出较好的生物学活性，如降血糖、抗氧化、抗菌、抗病毒、抑制胆碱酯酶及单胺氧化酶，保护心血管系统及缺血性脑损伤等作用，已引起科研工作者的广泛关注。

虽然去甲基雏叶龙胆酮与雏叶龙胆酮在药用植物中分布广泛，但是其在植物中的含量比较低。截止目前，有关雏菊叶龙胆酮的制备方法多为溶剂萃取(或同时辅以超声等手段)，再借助多种分离介质，如HP-20树脂、大孔吸附树脂、硅胶、葡聚糖凝胶以及制备液相色谱、高速逆流色谱(HSCCC)等技术来实现其提取分离和纯化，但都具有产率低，纯度不能满足要求，无法工业扩大化生产等问题。

发明内容

本发明提供一种去甲基雏叶龙胆酮与雏叶龙胆酮的制备方法，所述方法在收率达到80％的前提下，得到纯度达99％的去甲基雏叶龙胆酮与雏叶龙胆酮的纯品，并且体系中采用的甲醇，可以回收利用，也节约了成本，对环境友好。

为解决以上技术问题，本发明提供了一种去甲基雏叶龙胆酮与雏叶龙胆酮的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)提供苦龙胆、水灵芝、水黄莲中、獐牙菜、尖叶假龙胆的一种或几种，用醇溶液加热回流提取，合并提取液A，减压浓缩得浓缩液B；

2)浓缩液B用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯层，减压浓缩得浸膏C；

3)取浸膏C，上硅胶柱进行层析色谱分离，以二氯甲烷-甲醇体系梯度洗脱，在二氯甲烷-甲醇体积比从100：0到40:1期间，收集溶液D；在二氯甲烷-甲醇体积比从40:1到10:1期间，收集溶液E；

4)溶液D浓缩为浸膏H，H用乙酸乙酯重结晶得产品I，真空干燥后得雏叶龙胆酮纯品；溶液E通过制备型高效液相色谱纯化，得产品J，真空干燥后得去甲基雏叶龙胆酮纯品。

优选的，步骤1)中的药材为苦龙胆、水灵芝、水黄莲中的一种或几种。

优选的，步骤1)中醇溶液为甲醇或95％乙醇溶液。

优选的，步骤1)中提取温度为60-70℃。

优选的，步骤1)中提取时间为0.5-2小时。

优选的，步骤1)中提取时间为1小时。

优选的，步骤1)中提取次数为4-6次。

优选的，步骤3)还包括溶剂回收步骤，所述步骤为获得溶液E后，用甲醇冲柱，收集溶液F，所述溶液F用于回收利用甲醇。

优选的，步骤4)中溶液E的制备型高效液相色谱的制备条件为甲醇与水体系，检测波长为254nm。

更为优选的，步骤4)甲醇与水体系的体积比为甲醇：水＝60：40-80：20。

本发明中，将药材粉碎，通过加热回流提取，萃取浓缩的方法得到粗品，后通过柱层析色谱，在二氯甲烷-甲醇体系中，收集不同区段的洗脱液，进而通过重结晶及制备液相色谱对前述产物进行纯化，真空干燥后得到去甲基雏叶龙胆酮与雏叶龙胆酮的纯品，采用本发明所述的技术方案，收率可达80％，并且纯度大于99％，适合工业化生产，并且体系中采用的甲醇，可以回收利用，也节约了成本，对环境友好。

具体实施方式

为了使本领域的技术人员更好地理解发明的技术方案，下面结合具体实施方式对本发明作进一步的详细说明。

去甲基雏叶龙胆酮与雏菊叶龙胆酮主要分布于龙胆科獐牙菜属(33种)、假龙胆属(20种)、龙胆属(7种)植物中。此外，其在龙胆科扁蕾属(1种)、腺鳞草属(1种)、萝藦科娃儿藤属(1种)和鸢尾科鸢尾属(1种)植物中也有少量分布。雏菊叶龙胆酮在降血糖、抗氧化、抗菌、抗病毒、抑制胆碱酯酶及单胺氧化酶、保护心血管系统及缺血性脑损伤等方面具有一定的疗效。同时毒性研究证实，该化合物安全，且没有表现出明显的致突变作用。