[发明专利]裂性弧菌噬菌体ValLY-4及包含该噬菌体的杀菌组合物及其应用

说明书

本发明涉及裂性弧菌噬菌体ValLY‑4及包含该噬菌体的杀菌组合物及其应用。该噬菌体可在短时间内快速抑制弧菌的生长，且抑制作用维持时间长。此外，该噬菌体的杀菌组合物安全、有效，且特异性强，生产成本低，在致病菌的控制过程中弥补了单一噬菌体疗法的不足。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种裂性弧菌噬菌体 ValLY-4及包含该噬菌体的杀菌组合物及其应用。

背景技术

我国是水产养殖大国。近年来，我国的水产养殖业获得迅猛发展。随着海水养殖规模的日益扩大和集约化养殖方式的不断推广，鱼类疾病的频繁发生对海水鱼类规模化养殖的健康发展造成了严重的威胁。鱼类的病原体主要包括细菌、病毒、寄生虫等，其中细菌性疾病是对鱼类危害程度较为严重的一类疾病。

弧菌是能运动的芽孢短杆状细菌，广泛分布于近海岸、河口海区海水及生物体内，是海洋中最常见的细菌类群之一，同时也是引起海水养殖鱼虾细菌性疾病最重要的病原菌之一。弧菌的致病强度与宿主的生理状态及水质环境条件等综合因素有关，属于条件性致病菌，其主要通过口或伤口感染，产生毒素，致使伤口肌肉溃烂化脓以及内脏器官的严重病变从而导致鱼虾类的死亡。由弧菌引起的疾病又称弧菌病，具有“流行面积广，发病率高，致死性强”等特点，是水产养殖动物的主要疾病，同时也被确定为是阻碍水产养殖业发展的重要限制性因素，给养殖业造成了巨大的危害。其中，以鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)和杀鲑弧菌(Vibrio salmonicida)等弧菌引起的弧菌病被认为是鱼虾类养殖中最为严重的病害之一。目前，针对水产养殖相关动物疾病的预防和控制方法主要以化学抗生素法和免疫疫苗法，其中以化学抗生素使用为主。作为当前控制水产动物疾病的主要手段，化学抗生素法具有使用方便、见效快和疗效好等优点。但是，大批量频繁使用抗生素在控制病原菌的同时，极大了助长了病原菌的耐药性，并加速了广谱耐药菌的产生。这使得致病菌的耐药性问题日益严重。此外，化学药物残留也是导致人类食源性疾病产生的重要原因之一，对人类健康造成严重危害。

噬菌体又称细菌性病毒，是一类专一性裂解细菌的病毒，在环境中分布广泛，种类多样，结构简单，具有很强的宿主特异性。最重要的一点，噬菌体裂解细菌的机制不受细菌耐药性的影响，其通过受体识别从而吸附在特定宿主菌表面，将自身遗传物质注入宿主体内进行自我复制组装，并最终通过裂解宿主菌释放子代从而实现自我的生长繁殖。利用噬菌体控制水产致病菌早在噬菌体被发现之前就有应用，但由于对噬菌体的研究不够充分，而抗生素在当时具有广谱抑菌效果，且疗效好见效快，这使得噬菌体应用被大大削弱。近年来，由于抗生素滥用引发的一系列耐药菌问题，使得噬菌体重新回归人们的视野，应用噬菌体控制致病菌的研究也在科学界引起了广泛兴趣。作为应对抗生素抗性的重要武器之一，噬菌体的临床应用潜力巨大，但就其当前单一噬菌体疗法的应用而言，其在应用过程中仍存在一些潜在的缺点，如裂解宿主谱窄，裂解能力持续时间短，宿主菌易产生抗性等，其中以宿主菌易产生抗性为单株噬菌体应用的主要缺陷。

针对以上单一噬菌体疗法存在的不足，将多种噬菌体混合使用的鸡尾酒疗法应运而生。其通过多种噬菌体之间的复配既扩大了宿主谱范围，同时有效的抑制宿主菌抗性的产生，具有快速高效的裂解作用，目前在临床应用的研究中已取得较好的效果。此外，噬菌体鸡尾酒通过噬菌体之间的协同作用降低了在相等条件下单株噬菌体的添加剂量，起到了节约成本的作用。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容