[发明专利]一种触珠蛋白测定试剂盒

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及蛋白质测定试剂盒，更具体涉及一种触珠蛋白测定试剂。述的触珠蛋白测定试剂盒包含独立包装的试剂1和试剂2。上述试剂1的配方包括：50‑150mM三羟甲基氨基甲烷缓冲液、3‑12g/L聚氧乙烯月桂醚‑35、3‑8g/L牛血清白蛋白、4‑8g/L氯化钠和0.1‑0.3mL/L液体生物防腐剂。上述试剂1和试剂2中还包括增强剂，加入增强剂后，试剂的稳定性大大提高。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及蛋白质测定试剂盒，更具体涉及一种触珠蛋白测定试剂。

背景技术

触珠蛋白又称结合珠蛋白，是一种急性时相蛋白，在肝细胞合成，是由两条轻链(α链)和两条重链(β链)组成的糖蛋白。触珠蛋白能结合溶血引起的游离血红蛋白，并转运到肝细胞进行降解。溶血发生时，由于其清除速度比肝脏合成新的触珠蛋白速度快得多，所以任何能使红细胞破碎引起血红蛋白增多的情况，都会使血清中触珠蛋白浓度降低。溶血性贫血、肝细胞损害时浓度显著降低；炎症、创伤和冠心病时浓度明显升高。因此触珠蛋白的测定有重要的生物学和医学意义。触珠蛋白抗体可与血清中的触珠蛋白产生凝集反应，形成抗原抗体复合物，其浊度高低在一定量抗体存在时与血清中触珠蛋白成正比。通过测定特定波长的吸光度值，参照校准曲线即可计算出血清中触珠蛋白的浓度。

一个层面上，目前面市或公开的触珠蛋白检测试剂或试剂盒的种类并不多。一方面使得用户所能够选择的范围比较窄；另一方面，面市产品少意味着市场竞争小，价格高，进而用户使用成本居高不下；再一个方面，也使得这一类型的产品难以通过活跃的市场竞争形成有效的技术促进，进而使得该类型产品在技术上长期没有新进展。

另一个层面上，就目前已公开的触珠蛋白测定产品来看，虽然产品种类不足，但其在实际应用中已经暴露出严重的技术问题。例如，国家食品药品监督管理局于2012年11月26日发布了：Ortho-Clinical Diagnostics,Inc公司对触珠蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)进行召回，由于用户使用时频繁出现样品处理和无法获得测定结果的问题，该公司对其生产的部分型号批次的触珠蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)(注册号：国食药监械(进)字2010第2402877号)进行主动召回。虽然这次召回没有涉及中国市场，但仍然反映出了目前触珠蛋白检测试剂(盒)存在一定的技术缺陷和不稳定性。

目前我国国内也有一些触珠蛋白测定产品面市。例如浙江康特生物科技有限公司(市售1)或宁波瑞源生物科技有限公司(市售2)生产的触珠蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)，这两种试剂盒均供体外定量检测人血清中触珠蛋白的含量。这两种试剂盒的产品储存条件及有效期均为：2-8℃条件下(干燥、避光)储存，有效期12个月。经实际验证，这两种试剂盒在开启后，其中的试剂在2-8℃避光保存最多稳定30天，其中的校准品在2-8℃避光保存最多稳定7天。有的市售触珠蛋白测定产品的密封有效期甚至只有6个月不到。而一个产品从出厂，到经历各级经销商，再到医院或其他使用机构，所经历的的流通或运输时间很多情况下长达数月之久。也就是说上述试剂盒在到达用户手中之时其实际有效期已经大大缩短，再加上试剂一旦开启其稳定期仅仅数天，最多数十天。以上原因会导致大量开封前过期产品或开封后失效产品，理论上这些过期或失效产品应当废弃或回收，但实际上其中的一部分仍混杂在流通途径中。这一方面造成了资源的极大浪费，另一方面造成了市场的混乱，更甚者这些过期失效产品一旦用于检测者很可能造成错误的测定结果从而引起严重医疗事故。

技术人员虽然无法参与到商品流通的管理，然而却能够技术层面尽可能的减少上述情况发生的可能性。因此，提高触珠蛋白测定产品的稳定性、简化其保存条件应当是该领研发人员致力研究的一个重要方向。

目前能够检索到的最新的技术更新是中国专利申请201510407469公开的一种触珠蛋白测定试剂盒，然而该发明的侧重点是试剂盒的机械构造，其仅仅公开了触珠蛋白检测中的部分常规试剂，例如聚乙二醇、磷酸盐缓冲液、羊抗人触珠蛋白抗体、牛血清白蛋白等。并且并未对如何提高检测试剂盒的稳定性提供任何新思路。