[发明专利]一种基于毛细管电泳的多染料集核酸分析方法及其应用在审
申请号: | 201711167767.3 | 申请日: | 2017-11-21 |
公开(公告)号: | CN107976478A | 公开(公告)日: | 2018-05-01 |
发明(设计)人: | 吕华;张吉华;陈功俊 | 申请(专利权)人: | 南京溯远基因科技有限公司 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)11371 | 代理人: | 王闯 |
地址: | 210000 江苏省南京市浦口区*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 毛细管 电泳 染料 核酸 分析 方法 及其 应用 | ||
1.一种基于毛细管电泳的多染料集核酸分析方法,其特征在于,包括:
在进行电泳之前,分别针对所要采用的多个荧光染料集进行光谱校正,得到各染料集的光谱校正矩阵,并根据每个通道产物所采用的荧光染料集设置图像采集设备的像素合并方法;
将待检测核酸分割为含有多个核酸片断的片断组合物,将所述片断组合物用所述多个荧光染料集同时或分别进行标记并使用多通道毛细管阵列电泳仪对标记好的片断组合物进行多通道电泳检测;
通过图像采集设备获得各通道的电泳数据,使用所述光谱校正矩阵对各通道所采集的所述电泳数据进行解谱。
2.根据权利要求1所述的基于毛细管电泳的多染料集核酸分析方法,其特征在于,当所述待检测核酸为DNA时,所述将待检测核酸分割为含有多个核酸片断的片断组合物的方法为PCR法。
3.根据权利要求2所述的基于毛细管电泳的多染料集核酸分析方法,其特征在于,当所述待检测核酸为RNA时,先进行逆转录,再利用PCR法将待检测核酸分割为含有多个核酸片断的片断组合物。
4.根据权利要求1所述的基于毛细管电泳的多染料集核酸分析方法,其特征在于,所述多个荧光染料集中的荧光染料标记于所述待检测核酸中的待检基因座上。
5.根据权利要求4所述的基于毛细管电泳的多染料集核酸分析方法,其特征在于,将所述荧光染料标记于所述待检测核酸中的待检基因座上的方法为:将所述荧光染料标记在每个基因座中一条引物的5’端。
6.根据权利要求5所述的基于毛细管电泳的多染料集核酸分析方法,其特征在于,扩增片断不重叠的基因座使用相同的荧光染料进行标记,扩增片断重叠的基因座使用不同的荧光染料进行标记。
7.根据权利要求1、4-6任一项所述的基于毛细管电泳的多染料集核酸分析方法,其特征在于,所述多个荧光染料集中的荧光染料包括FAM、VIC、NED、PET、LIZ、dR110、TAMRA、ROX、JOE、HEX、TET中的多种。
8.根据权利要求1所述的基于毛细管电泳的多染料集核酸分析方法,其特征在于,所述荧光染料集的数目≤所述多通道毛细管阵列电泳仪的最大通道数目。
9.根据权利要求1所述的基于毛细管电泳的多染料集核酸分析方法,其特征在于,进行所述光谱校正时所采用的校正试剂包括IdentifilerTM。
10.权利要求1~9任一项所述的基于毛细管电泳的多染料核酸分析方法在检测特定基因座的有无以及STR分型中的应用。
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