[发明专利]一种翻译水平基因表达调控的方法及应用有效
申请号: | 201711170314.6 | 申请日: | 2017-11-22 |
公开(公告)号: | CN107881174B | 公开(公告)日: | 2022-06-03 |
发明(设计)人: | 王骏 | 申请(专利权)人: | 张宝会 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/62;C12N15/67;C12N15/867 |
代理公司: | 苏州中合知识产权代理事务所(普通合伙) 32266 | 代理人: | 赵晓芳 |
地址: | 710000 陕西省西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 翻译 水平 基因 表达 调控 方法 应用 | ||
1.一种增强型基因表达调控元件,其特征在于,所述增强型基因表达调控元件可将目标真核产物基因的转录后翻译水平提高达10倍-20倍,所述增强型基因表达调控元件具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,所述基因为BRAF基因。
2.如权利要求1所述的增强型基因表达调控元件,其特征在于,所述增强型基因表达调控元件是与目标真核产物的核苷酸序列连接为嵌合体后,通过嵌合体遗传重组进入宿主而发挥激活翻译的功能。
3.一种包含权利要求1或2所述的增强型基因表达调控元件的嵌合编码结构,其特征在于,所述嵌合编码结构包含权利要求1所述的增强型基因表达调控元件和目标真核产物的核苷酸编码序列的5’端到3’端顺次连接物,所述增强型基因表达调控元件的3’是连接在所述目标真核产物的核苷酸序列翻译起始密码子的上游1~20个碱基处。
4.一种真核蛋白高效表达的方法,包括步骤:
(1)构建包含权利要求3所述的嵌合编码结构的重组表达载体;(2)将(1)所得重组表达载体通过遗传操作转到宿主中,高效构建真核目标产物重组表达细胞;(3)将(2)所得高效真核目标产物细胞于生物反应器中加蛋白表达诱导剂重组表达,工业化培养;(4)从(3)所得培养产物中纯化目标产物。
5.如权利要求4所述的真核蛋白高效表达的方法,其特征在于,所述宿主选自细菌、真菌、哺乳动物细胞、植物细胞。
6.包含权利要求1所述的增强型基因表达调控元件或权利要求3所述的嵌合编码结构的遗传重组载体,所述遗传重组载体包含原核载体和真核载体。
7.一种病毒转染系统,可将权利要求6所述的遗传重组载体转染真核宿主细胞。
8.如权利要求7所述的病毒转染系统,其特征在于,所述病毒转染系统包括脂质体转染试剂、慢病毒、逆转录病毒。
9.权利要求1所述的增强型基因表达调控元件在制备上调或激活转录后翻译水平调控基因表达的试剂中的用途。
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