[发明专利]一种高效表达的猪圆环病毒2型Cap-穿膜肽融合蛋白基因及其应用

权利要求书

1.一种猪圆环病毒2型Cap-穿膜肽融合蛋白基因，其特征在于：该基因为（1）~（2）中的任意一种：

（1）融合穿膜肽TAT基因序列的Cap基因；

（2）融合穿膜肽ppTG20基因序列的Cap基因；

所述融合穿膜肽TAT基因序列的Cap基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

所述融合穿膜肽ppTG20基因序列的Cap基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.根据权利要求1所述的猪圆环病毒2型Cap-穿膜肽融合蛋白基因，其特征在于：所述融合穿膜肽TAT基因序列的Cap基因的制备过程为：根据穿膜肽TAT基因序列TATGGCAGGAAGAAGCGGAGACAGCGACGAAGA和pVax-cap中Cap基因序列，设计引物TAT-cap-F，5’-CGCTCGAGATGTATGGCAGGAAGAAGCGGAGACAGCGACGAAGAATGACCTACCCCC -3’，Cap-R，5’-CGGGTACCTCAATGGTGATGGTGATGATGCTTGGGGTTCAGGG-3’，以重组质粒pVax-cap为模板，扩增得到TAT-cap基因；

所述融合穿膜肽ppTG20基因序列的Cap基因的制备过程为：根据穿膜肽ppTG20基因序列GGTCTGTTCCGAGCACTGCTGCGACTGCTGCGATCTCTGTGGCGACTGCTGCTGCGAGCA和pVax-cap中Cap基因序列，设计引物ppTG20-cap-F1，5’-CGCTCGAGATGGGTCTGTTCCGAGCACTGCTGCGACTGCTGCGATCTCTGTGGCGACT-3’，ppTG20-cap-F2，5’-CTGCTGCGATCTCTGTGGCGACTGCTGCTGCGAGCAATGACCTACCCCCGCCGCCG-3’，Cap-R，5’-CGGGTACCTCAATGGTGATGGTGATGATGCTTGGGGTTCAGGG-3’，以重组质粒pVax-cap为模板，两次PCR扩增得到ppTG20-cap基因。

3.包含有权利要求1或2所述猪圆环病毒2型Cap-穿膜肽融合蛋白基因的表达盒、重组表达载体、重组杆状病毒、转基因细胞系或转基因重组菌。

4.一种重组杆状病毒，其特征在于：采用以下过程制备：将权利要求1或2所述的猪圆环病毒2型Cap-穿膜肽融合蛋白基因克隆至杆状病毒载体pFast-Bac-Dual后，将阳性重组载体质粒转化DH10Bac感受态，同源重组，获得重组Bacmid，将重组Bacmid转染Sf9细胞进行培养获得重组杆状病毒。