[发明专利]一种生物体中微塑料的检测方法有效
申请号: | 201711178353.0 | 申请日: | 2017-11-23 |
公开(公告)号: | CN108181154B | 公开(公告)日: | 2023-04-18 |
发明(设计)人: | 李承勇;闫协民;吕露露;孙省利;千忠吉;周春霞;洪鹏志 | 申请(专利权)人: | 广东海洋大学;广东海洋大学深圳研究院 |
主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N1/34;G01N1/40;G01N15/14;G01N21/3563;G01N23/2202 |
代理公司: | 北京锺维联合知识产权代理有限公司 11579 | 代理人: | 罗银燕 |
地址: | 524088 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物体 塑料 检测 方法 | ||
本发明涉及一种检测生物体样品中微塑料的方法,包括:S110,消解:将生物体样品用浓度为50‑70%的硝酸在室温下浸泡6‑18小时,加热到60‑95℃并维持1‑4小时,得到消解的生物体样品;S120,脱脂:将步骤S110中得到的消解的生物体样品趁热用60‑95℃的表面活性剂溶液冲洗和抽滤,得到脱脂的微塑料;S130,将步骤S120中得到的脱脂的微塑料用60‑95℃的水冲洗和抽滤,得到清洗的微塑料。本发明的方法能够快速、准确地对进入生物体中的微塑料进行定性和定量检测,实现了检测微塑料在生物体内的富集和分布的目的,为环境监测提供了实用的工具。
技术领域
本发明属于环境污染物检测领域,尤其是涉及一种生物体中微塑料的检测方法,特别是一种利用荧光显微镜计数的方法检测生物体中微塑料的方法。
背景技术
塑料由于其成本低,化学性质稳定,抗冲击性能好等特点,在日常生活中被大量使用,但因其难以降解,加剧了环境污染,海洋塑料污染情况尤为突出。海水中的塑料污染物在光、热、生物等因素逐渐降解成微小颗粒,称之为微塑料。一旦水中的微塑料污染升高,就会对海洋生物造成毒理学反应,例如诱发遗传畸变,生殖异常,激素紊乱或组织出现毒理学变化等。研究牡蛎中微塑料的成分和含量,不仅可以阐明其污染机制,更能为海洋食品安全提供保障。
因此,仍然需要开发新的检测生物体中微塑料的方法。
发明内容
为了解决上述现有技术中的问题,本发明提供了以下技术方案。
本发明的一个方面提供一种检测生物体样品中微塑料的方法,包括:
S100,从生物体样品中提取微塑料的步骤,包括:
S110,消解:将生物体样品用浓度为50-70%的硝酸在室温下浸泡6-18小时,加热到60-95℃并维持1-4小时,得到消解的生物体样品;
S120,脱脂:将步骤S110中得到的消解的生物体样品趁热用60-95℃的表面活性剂溶液冲洗和抽滤,得到脱脂的微塑料;
S130,将步骤S120中得到的脱脂的微塑料用60-95℃的水冲洗和抽滤,得到清洗的微塑料。
进一步地,步骤S100还包括:将得到的清洗的微塑料加入水中,然后超声处理,得到微塑料悬浮液。
进一步地,所述抽滤是用微孔滤膜进行的抽滤。
进一步地,步骤S100还包括:
S140,分级:用密度不同的溶液将微塑料按密度分级;优选地,所述溶液选自密度为1g/cm3的水、密度为1.19g/cm3的饱和氯化钠水溶液、密度为0.91g/cm3的58.4%乙醇水溶液、密度为0.925g/cm3的55.4%乙醇水溶液、以及密度为1.27g/cm3的27.5%氯化钙水溶液。
进一步地,所述表面活性剂是十二烷基硫酸钠。
进一步地,所述检测生物体中微塑料的方法,还包括:
S200,将步骤S100中得到的清洗的微塑料进行染色,包括:用氨基硅氧烷与微塑料接触以便得到具有氨基的微塑料,然后用异硫氰酸荧光素与具有氨基的微塑料接触得到染色的微塑料。
进一步地,在步骤S200中,所述氨基硅氧烷为(3-氨丙基)三甲氧基硅烷,按照19:1的比例将甲醇和(3-氨丙基)三甲氧基硅烷加入微塑料中以便得到具有氨基的微塑料。
进一步地,所述检测生物体中微塑料的方法,还包括:
S300,用显微镜观察步骤S200中得到的染色的微塑料,并对微塑料的颗粒进行计数。
进一步地,所述检测生物体中微塑料的方法,还包括:
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