[发明专利]一株在高盐环境下降解孔雀石绿的产气肠杆菌

说明书

本发明公开了一株降解孔雀石绿的产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)S27，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2017452，保藏日期为2017年8月28日，保藏地址为中国武汉，武汉大学，该菌能够耐盐、可以适应恶劣环境，使用成本低，生态恢复好等优点，适用于废水中孔雀石石绿的降解，为因孔雀石绿造成的环境污染提供了有益的菌种资源。

技术领域：

本发明属于环境微生物领域，具体涉及一株分离自灰绿碱蓬的产气肠杆菌，及其在高盐浓度条件下降解孔雀石绿的方法和应用。

背景技术：

孔雀石绿(Malachite Green,MG)又名碱性绿，呈蓝绿色有金属闪光的结晶，易溶于水，是一种合成的三苯甲烷类工业染料，曾被广泛用于真丝、羊毛、棉布等染色剂等。因孔雀石绿在杀灭鱼类体内寄生虫、防治水霉病、烂鳃病等有非常明显的效果，因此在水产养殖中曾得到广泛应用。但研究发现孔雀石绿的重要官能团为三苯甲烷，它是一种强致癌物质，通过食物链对人类社会和自然环境造成了重大影响，因此，美国、日本、英国等许多国家和地区，立法严禁使用孔雀石绿，目前我国也已将孔雀石绿列为禁用药物，但由于本身出色的药理效果和低廉的价位，目前仍有偷偷使用的违规现象。

现阶段对于染料废水的处理主要是采用传统的理化处理方法，有物理方法和化学方法等。物理方法主要是通过设计媒介对孔雀石绿吸附、渗透膜过滤和沉降作用去除，化学方法主要有异相光催化、光电催化和电化学方法等。但是由于处理成本较高、效率低下，往往在处理过程的同时容易产生二次污染和难以处置的底泥，因此，极大地限制了其广泛推广使用，设计一种对环境影响较小同时又能够高效率降解染料方法被科学研究者们迫切的提上了日程。

微生物由于繁殖速度快，对恶劣环境适应能力强，且易产生大量降解相关酶等优点使微生物处理技术受到研究者们的青睐，而筛选出具有高效降解能力的菌株具有重要的实践意义。许多研究表明，假单胞菌、芽孢杆菌、酵母菌等对三苯甲烷类的染料具有脱色功能，针对肠杆菌属(Enterobacter)菌株降解孔雀石绿的报道较少，CN104830729A中公开了一株可以降解孔雀石绿的肠杆菌属(Enterobacter sp.)菌株CV-v；目前，仍未有针对产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)可以降解孔雀石绿的相关报道。

本发明的发明人从灰绿碱蓬分离筛选出一株产气肠杆菌(Enterobacteraerogenes)，该菌株对孔雀石绿具有高效的脱色能力，并且还适于在高盐环境下降解孔雀石绿，丰富了能够降解孔雀石绿染料的微生物资源库，对解决孔雀石绿的脱色问题提供了确实可行的方法。

发明内容：

本发明的目的是提供一株降解孔雀石绿的产气肠杆菌(Enterobacteraerogenes)，及其在高效降解孔雀石绿中的应用。该菌能够适应恶劣环境，高盐条件下耐受性好，使用成本低，生态恢复好，等优点，十分适用于孔雀石石绿的降解，为因孔雀石绿造成的环境污染提供了有益的菌种资源。

一方面，本发明提供了一株降解染料废水中的孔雀石绿的产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)S27，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M 2017452，保藏日期为2017年8月28日，保藏地址为中国武汉，武汉大学，该菌分离自灰绿碱蓬，菌落粘稠呈乳白色，表面平滑，最适生长温度为30℃，PH＝7。

另一方面，本发明还提供了产气肠杆菌S27的培养方法，所述方法包括将菌株接种于LB液体培养基中，在合适温度和pH条件下培养一段时间，得到菌株培养物。所述温度为25～35℃，优选30℃；所述pH为4-8，优选7；所述培养时间为12-48小时，优选24-36小时。所述培养优选为摇床培养，转速优选为150～200rpm。