[发明专利]一种手性2-氨基-1-丁醇的合成方法有效
| 申请号： | 201711181396.4 | 申请日： | 2017-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN109825538B | 公开（公告）日： | 2022-05-24 |
| 发明（设计）人： | 孙周通;赵强;刘保艳;曲戈 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12P13/00 | 分类号： | C12P13/00;C12N9/04;C12N9/06;C12N9/10 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;张立娜 |
| 地址： | 300308 天津市东*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 手性 氨基 丁醇 合成 方法 | ||
1.一种手性2-氨基-1-丁醇的合成方法，包括如下步骤：
（A）以1，2-丁二醇为底物，经酶A及其辅酶催化反应生成2-酮-1-丁醇；
（B）以步骤（A）生成的2-酮-1-丁醇为底物，经酶B及其辅酶催化反应生成手性2-氨基-1-丁醇；
所述酶A和所述酶B为如下三种组合中的任一种：
第一种组合：
所述酶A选自如下任一种：
（a1） 来源于短小乳杆菌（
（a2）来源于嗜热脂肪芽胞杆菌（
（a3）来源于高温厌氧杆菌（
（a4）来源于高加索酸奶乳杆菌（
（a5） 来源于芽孢杆菌科（
（a6）来源于赖氏菌属（
（a7）来源于威吉利热厌氧杆菌（
（a8）与SEQ ID No.2所示来源于短小乳杆菌的醇脱氢酶相比，仅存在如下突变I11V；
（a9）与SEQ ID No.2所示来源于短小乳杆菌的醇脱氢酶相比，仅存在如下突变： G37D；
（a10）来源于赭色掷孢酵母的羰基还原酶，氨基酸序列为SEQ ID No.16；
（a11）在（a1）-（a10）中任一所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白；
所述酶B选自如下任一种：
（b1）来源于嗜热脂肪芽胞杆菌的亮氨酸脱氢酶，氨基酸序列为SEQ ID No.18；
（b2）与SEQ ID No.18所示来源于嗜热脂肪芽胞杆菌的亮氨酸脱氢酶相比，仅存在如下突变：K68S/N261L；
（b3）与SEQ ID No.18所示来源于嗜热脂肪芽胞杆菌的亮氨酸脱氢酶相比，仅存在如下突变：K68Y/N261C；
（b4）Codexis公司的ATA-117转氨酶，氨基酸序列为SEQ ID No.20；
（b5）来源于土曲霉（
（b6）来源于烟曲霉菌（
（b7）来源于费希新萨托菌（
（b8）来源于玉米赤霉（
（b9）来源于分支杆菌（
（b10）在（b1）-（b9）中任一所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白；
第二种组合：
所述酶A选自如下任一种：
（a1） 来源于短小乳杆菌（
（a2）来源于嗜热脂肪芽胞杆菌（
（a3）来源于高温厌氧杆菌（
（a4）来源于高加索酸奶乳杆菌（
（a5） 来源于芽孢杆菌科（
（a6）来源于赖氏菌属（
（a8）与SEQ ID No.2所示来源于短小乳杆菌的醇脱氢酶相比，仅存在如下突变I11V；
（a9）与SEQ ID No.2所示来源于短小乳杆菌的醇脱氢酶相比，仅存在如下突变： G37D；
（a12）在（a1）-（a6）和（a8）-（a9）中任一所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白；
所述酶B选自如下任一种：
（b9）来源于分支杆菌（
（b11）来源于巨大芽孢杆菌（
（b12）在（b9）或（b11）所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白；
第三种组合：
所述酶A选自如下任一种：
（a7）来源于威吉利热厌氧杆菌（
（a10）来源于赭色掷孢酵母的羰基还原酶，氨基酸序列为SEQ ID No.16；
（a13）在（a7）或（a10）所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白；
所述酶B选自如下任一种：
（b11）来源于巨大芽孢杆菌（
（b13）来源于铜绿色假单胞菌（
（b14）在（b11）或（b13）所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白；
所述第一种组合中的酶用于合成的所述手性2-氨基-1-丁醇为(
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