[发明专利]一种施氏鲟精子冷冻保存液及施氏鲟精子的长期冷冻保存方法在审
| 申请号： | 201711183567.7 | 申请日： | 2017-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN107873698A | 公开（公告）日： | 2018-04-06 |
| 发明（设计）人： | 张秀娟;陈金平;吴文化;马荆鄂;李林妙;江海英 | 申请（专利权）人： | 广东省生物资源应用研究所 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司44001 | 代理人： | 郝文婷,刘明星 |
| 地址： | 510260 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 施氏鲟 精子 冷冻 保存 长期 方法 | ||
1.一种施氏鲟精子冷冻保存液，其特征在于，每升所述施氏鲟精子冷冻保存液的pH为7.5～8.5，包括如下组分：20～30mM蔗糖，0.1～0.5mM氯化钾，20～40mM Tris-HCl，5～10g/L牛血清白蛋白，2.5～10mM还原型谷胱甘肽和抗冻成分，其余为超纯水；
所述抗冻成分选自10体积％甲醇、15体积％DMSO、15体积％DMSO与10体积％新鲜蛋黄的混合、15体积％丙二醇、15体积％丙二醇与10体积％新鲜蛋黄的混合中的任意一种。
2.权利要求1所述施氏鲟精子冷冻保存液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将蔗糖、氯化钾、Tris-HCl和还原型谷胱甘肽和超纯水加入容器中，搅拌溶解后依次加入牛血清白蛋白和抗冻成分，调节pH至7.5～8.0，定容，得到施氏鲟精子冷冻保存液。
3.权利要求1所述施氏鲟精液冷冻保存液在施氏鲟精子长期冷冻保存中的应用。
4.一种施氏鲟精子的长期冷冻保存方法，其特征在于，包括如下步骤：
取精子活力大于90％的施氏鲟精液，将施氏鲟精液用施氏鲟精子冷冻保存液按照1:1的体积比稀释后，分装至0.5mL冻存细管中，采用分段平衡冻存法冻存施氏鲟精子，即先将冻存细管置于0℃的冰水混合物中平衡5～10min，再置于液氮表面10cm处平衡5～10min，最后将冻存细管浸入-196℃液氮长期冷冻保存。
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