[发明专利]一株高产葡萄糖氧化酶生产工艺在审
| 申请号： | 201711183906.1 | 申请日： | 2017-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN109825483A | 公开（公告）日： | 2019-05-31 |
| 发明（设计）人： | 韩国宝;梁爱民;张天航 | 申请（专利权）人： | 朝阳华星生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N1/16;C12R1/84 |
| 代理公司： | 锦州辽西专利事务所(普通合伙) 21225 | 代理人： | 王佳佳 |
| 地址： | 122300 辽宁省*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 葡萄糖氧化酶 发酵 接种 发酵培养基 毕赤酵母 发酵液 生产工艺 麦芽汁琼脂培养基 二级培养种子液 二级发酵种子 二级种子培养 发酵生产工艺 离心喷雾干燥 一级发酵种子 一级种子培养 高产 发酵工艺 发酵培养 菌种活化 优化控制 诱导表达 产业化 规模化 接种液 制备 生产成本 优化 | ||
1.一株高产葡萄糖氧化酶生产工艺，其特征是：
具体步骤如下：
(1)培养基组成
麦芽汁琼脂培养基：麦芽汁1.0L，琼脂15.0g，pH自然；
一级种子罐培养基：葡萄糖1.5％-2.5％，蛋白胨1.5％-2.5％，酵母粉1％-1.5％；
发酵培养基：葡萄糖5％，磷酸二氢铵5％，磷酸二氢钾0.5％，硫酸钾2.5％，硫酸镁1.8％，硫酸钙0.5％，氢氧化钾0.2％，微量元素L 0.6％，甲醇0.05％，消泡剂0.03％；
(2)菌种培养
将发酵毕赤酵母(Pichia fermentans)编号2.1838中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，用麦芽汁琼脂培养基在温度25℃-28℃下，发酵培养24h，作为一级发酵种子液；
(3)一级种子培养
将一级发酵种子液接种到发酵培养基中进行一级种子培养，接种量为3％-5％，培养温度为28℃-30℃，风量为1:2vvm，转速160rpm，培时24h，作为二级培养种子液；
(4)二级种子培养
将二级种子接种液接种到发酵培养基中进行二级种子培养，接种量为3％-5％，培养温度为28℃-30℃，风量为1:2vvm，转速为160rpm-180rpm，培养时间为48h，发酵结束后，收集二级发酵种子液；
(5)发酵培养
将二级发酵种子液接种至发酵罐中，进行发酵培养，接种量为3％-5％，培养温度为28℃-30℃，0-40h溶氧＞40％，40h以后溶氧＞20％，进行诱导表达，培养时间为100h，发酵结束，收集罐内发酵液；
(6)喷雾干燥
在发酵液经过离心喷雾干燥，在170℃下喷雾干燥，制得葡萄糖氧化酶粉末。
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