[发明专利]一种使用循环酶法的二氧化碳试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及体外诊断领域，特别是涉及一种使用循环酶法的二氧化碳试剂盒。

背景技术

二氧化碳总量(T-CO₂)是指血浆中各种形式的CO₂总和，包括HCO₃^-(95％)、少量物理溶解的CO₂及极少量的其他形式存在的CO₂。因此在体内受呼吸和代谢两个因素的影响，主要是代谢因素的影响。T-CO₂可以用酶法、电极法、滴定法或量积法等。其中酶法测定T-CO₂，试剂打开使用后易吸收空气中的二氧化碳导致试剂中的NADH类物质被氧化失效，电极法一般与电解质分析仪组合在一起，CO₂电极膜需定期更换。酶法中均使用NADH类物质作为反应标定物，由于空气中二氧化碳的存在易致使二氧化碳测定试剂盒缺乏稳定性，保存时间短，直接影响临床使用。

目前关于二氧化碳测定试剂NADH类似物循环再生系统的报道非常有限。专利CN 2653492Y提供了一种二氧化碳结合力测定器；使用的测试方法为量积法，未对适用于生化分析仪的试剂盒的稳定性进行改进；专利CN200610097207.0提供了一种二氧化碳试剂盒的制备方法，但未作NADH类似物循环再生的相关讨论，在实际应用中试剂盒的稳定性较差；CN 103698500B提供一种增强二氧化碳检测试剂稳定性的方法，但主要采取的手段为加入油性物质及表面活性剂以减少试剂与空气中二氧化碳的接触，但引入的油性物质可能对生化分析仪的各机械模块有其他影响，且未对试剂盒的NADH稳定性进行改良；专利CN103558370 A作了一些关于还原性物质的循环再生的讨论，但未涉及循环再生时的供能物质，未能有效保证试剂试剂使用中的稳定性要求。因此，研究一种配制简单、成本低廉、针对二氧化碳测定试剂盒有稳定效果的NADH类似物循环再生系统，具有相当的市场价值。

发明内容

本发明的目的在于公开一种使用循环酶法的二氧化碳试剂盒。

本发明所采取的技术方案是：

一种使用循环酶法的二氧化碳试剂盒，试剂盒由NADH类似物循环再生系统和二氧化碳测定试剂组成。

优选的，试剂盒中NADH类似物循环再生系统由6-磷酸-葡萄糖脱氢酶、己糖激酶、葡萄糖、腺嘌呤核苷三磷酸二钠盐组成。

优选的，试剂盒中NADH类似物循环再生系统由6-磷酸-葡萄糖脱氢酶5-50U/L、己糖激酶50-500U/L、葡萄糖1-5g/L、腺嘌呤核苷三磷酸二钠盐0.5-2.5g/L组成。

优选的，试剂盒中NADH类似物循环再生系统由6-磷酸-葡萄糖脱氢酶20U/L、己糖激酶200U/L、葡萄糖2g/L、腺嘌呤核苷三磷酸二钠盐1g/L组成。

优选的，试剂盒中二氧化碳测定试剂由Trisbase、盐酸、稳定剂、醋酸镁、草氨酸钠、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸钾、APADH、苹果酸脱氢酶、乙二胺四乙酸二钠、Proclin300组成。

优选的，稳定剂为明胶、三梨醇、丙三醇、乙二醇、牛血清白蛋白中的至少一种。

优选的，试剂盒中二氧化碳测定试剂由Trisbase 6g/L、盐酸1.8g/L、稳定剂1g/L、醋酸镁1g/L、草氨酸钠0.3g/L、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶0.1g/L、磷酸烯醇式丙酮酸钾0.6g/L、APADH 0.5g/L、苹果酸脱氢酶0.05g/L、乙二胺四乙酸二钠1g/L、Proclin300 1g/L组成。

本发明的有益效果是：该二氧化碳测定试剂盒配制简单、成本低廉，其中含有的NADH类似物循环再生系统能延长试剂盒的保存时间，有效提高测试稳定性、准确性、精密度。

具体实施方式

实施例1

由下述组分组成NADH类似物循环再生系统：6-磷酸-葡萄糖脱氢酶20U/L、己糖激酶200U/L、葡萄糖2g/L、腺嘌呤核苷三磷酸二钠盐1g/L。