[发明专利]杀虫蛋白在防治金龟子成虫中的应用

说明书

本发明涉及杀虫蛋白在防治金龟子成虫中的应用。所述杀虫蛋白至少选自Cry8H和/或Cry8G。

技术领域

本发明涉及杀虫蛋白在防治金龟子成虫中的应用。

背景技术

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis，Bt)是一种对多种害虫具有特异性杀虫活性的革兰氏阳性菌，其可产生晶体蛋白和可溶性分泌蛋白，由于这些蛋白对靶标害虫具有高效特异的杀虫活性，使其在全球范围内得到普遍应用。鞘翅目害虫蛴螬(金龟子幼虫)为害萌发种子幼苗、根茎，而金龟子成虫取食植物的叶片、花蕾和果穗，危害比幼虫更加严重。

目前，多关注对蛴螬(金龟子幼虫)的防治，忽视了对其成虫的防治。然而由于蛴螬属于土栖性害虫，因此，存在防治困难的特点。

发明内容

本申请采取了不同于现有技术中防治金龟子幼虫的手段，从防治金龟子成虫的角度出发，寻找对金龟子成虫具有良好杀虫活性的杀虫蛋白。

为此，本申请之一提供了杀虫蛋白在防治金龟子成虫中的应用，所述杀虫蛋白选自具有如(I)至(VIII)中的至少一种的氨基酸序列：

(I)Cry8H的氨基酸序列，优选Cry8Ha1的氨基酸序列；

(II)与(I)中的氨基酸序列的一致性在98％以上，且与(I)中的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列；优选其氨基酸序列为与(I)中的氨基酸序列的一致性在99.5％以上，且与(I)中的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列；

(III)由(I)中的氨基酸序列经过胰蛋白酶酶解后获得的55kDa和/或70kDa的蛋白片段的氨基酸序列；

(IV)与(III)中的氨基酸序列的一致性在98％以上，且与(III)中的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列；优选其氨基酸序列为与(III)中的氨基酸序列的一致性在99.5％以上，且与(III)中的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列；

(V)Cry8G的氨基酸序列，优选Cry8Ga1的氨基酸序列；

(VI)与(V)中的氨基酸序列的一致性在98％以上，且与(V)中的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列；优选其氨基酸序列为与(V)中的氨基酸序列的一致性在99.5％以上，且与(V)中的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列；

(VII)由(V)中的氨基酸序列经过胰蛋白酶酶解后获得的55kDa和/或70kDa的蛋白片段的氨基酸序列；

(VIII)与(VII)中的氨基酸序列的一致性在98％以上，且与(VII)中的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列；优选其氨基酸序列为与(VII)中的氨基酸序列的一致性在99.5％以上，且与(VII)中的氨基酸序列具有相同功能的氨基酸序列。

Cry8Ha1的氨基酸序列的Genbank登录号为AAW81032。优选Cry8Ha1的核苷酸序列的Genbank登录号为AY897354。

Cry8Ga1的氨基酸序列的Genbank登录号为AAT46073。优选Cry8Ga1的核苷酸序列的Genbank登录号为AY590188。

通过(II)、(IV)、(VI)或(VIII)限定的杀虫蛋白在与相应的氨基酸序列具有相同功能的同时，也具有与相应的氨基酸序列相当或者更优的效果。

在一个具体实施例中，所述金龟子选自华北大黑鳃金龟(Holotrichia oblitaFaldermann)、暗黑鳃金龟(Holotrichia parallela)和铜绿丽金龟(Anomala corpulentaMotsehulsiy)中的至少一种。

在一个具体实施方式中，杀虫蛋白在防治金龟子成虫中的应用，所述杀虫蛋白选自具有如(I)至(IV)中的至少一种的氨基酸序列：