[发明专利]一种月季愈伤组织的诱导培养基及其诱导方法在审
申请号: | 201711188337.X | 申请日: | 2017-11-24 |
公开(公告)号: | CN107821166A | 公开(公告)日: | 2018-03-23 |
发明(设计)人: | 宋良红;王政;杨志恒;李小康;宋盈龙;刘伟超;郭欢欢;王华 | 申请(专利权)人: | 郑州植物园 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 郑州立格知识产权代理有限公司41126 | 代理人: | 田小伍 |
地址: | 450042 河南省郑州市中*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 月季 组织 诱导 培养基 及其 方法 | ||
技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域,具体涉及一种月季愈伤组织的诱导培养基及其诱导方法。
背景技术
月季是我国最重要的景观植物,在鲜切花生产与应用中占有重要位置,组织培养技术是在人为创造的无菌条件下将植物的离体器官(如根、茎、叶、茎段、原生质体)、组织或细胞置于培养基内,并放在适宜的环境中,进行连续培养以获得细胞、组织或个体的技术。转基因技术是向植物基因片段中导入目的基因培育出转基因新品系,转基因技术为获得抗逆性强、花色特异的月季新品系提供了可能,而进行转基因的前提是诱导出适宜的愈伤组织,然而在愈伤组织的诱导与继代过程中,现有的诱导方法对愈伤组织的诱导率低,诱导的愈伤组织数量少,质地不理想,生长势弱,在继代过程中会逐渐死亡,无法诱导月季外植体产生愈伤组织,因此现有技术需要进一步的改进。
发明内容
本发明的目的在于提供一种诱导率高,诱导效果好的月季愈伤组织的诱导培养基及其诱导方法。
基于上述目的,本发明采取如下技术方案:
一种月季愈伤组织的诱导培养基,所述诱导培养基由MS、激素2,4-D、蔗糖和琼脂制成,其中各组分的含量为:激素2,4-D 2.4-2.6mg/L,蔗糖18-32g/L和琼脂6-8g/L。
进一步的,所述的诱导培养基中还添加激素6-BA,所述的6-BA为0.9-1.1mg/L。
进一步的,所述的诱导培养基中还添加激素TDZ,所述的TDZ为0.4-0.6mg/L。
一种月季愈伤组织的诱导培养基,所述诱导培养基由MS、激素NAA、激素KT、蔗糖和琼脂制成,其中各组分的含量为:激素NAA 1.9-2.1mg/ L,激素KT 1.4-1.6mg/ L,蔗糖18-32g/L和琼脂6-8g/L。
进一步的,使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)月季外植体的选取与预处理:选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片,并对其进行常规预处理;
(2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养,培养条件为:温度24-26℃、光照强度2000-3000Lx、光照11-13h/d、PH为5.7-5.9,培养25-30d后产生初始愈伤组织,45-50d后产生大量胚性愈伤组织。
进一步的,所述的选取月季的茎段为1.5-2cm,所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.25-0.5cm2。
进一步的,所述的月季外植体的预处理为:将选取的月季外植体,先使用流水冲洗1-2h,再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒28-32s,再转入HgCl2溶液中搅拌消毒7-9min,再使用无菌水冲洗3-4次。
进一步的,所述的乙醇的质量浓度为70%-75%,所述的HgCl2的质量浓度为0.05-0.15%。
采用本发明所述方法,可快速获得大量月季愈伤组织,相对于现有的诱导方法,其诱导率高,诱导的愈伤组织数量多,质地好,生长旺盛。
具体实施方式
实施例1
一种月季愈伤组织的诱导培养基,所述诱导培养基由MS、激素2,4-D、蔗糖和琼脂制成,其中各组分的含量为:激素2,4-D 2.4mg/L,蔗糖18g/L和琼脂6g/L。
使用所述的月季愈伤组织的诱导培养基的诱导方法,包括以下步骤:
(1)月季外植体的选取与预处理:选取月季的茎段或未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片,所述的选取月季的茎段为1.5cm,所述的未展开叶片、刚展开叶片、完全展开叶片为0.25cm2;并将选取的月季外植体,先使用流水冲洗1h,再将茎段、未展开叶片、刚展开叶片和完全展开叶片放入乙醇搅拌消毒28s,再转入HgCl2溶液中搅拌消毒7min,再使用无菌水冲洗3次,所述的乙醇的质量浓度为70%%,所述的HgCl2的质量浓度为0.05%。
(2)诱导培养:将茎段、未展开叶片、刚展开叶片或完全展开叶片放置在诱导培养基上培养,培养条件为:温度24℃、光照强度2000Lx、光照11h/d、PH为5.7,培养25d后产生初始愈伤组织,45d后产生大量胚性愈伤组织。
实施例2
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