[发明专利]一种虾青素含量的检测方法

权利要求书

1.一种软胶囊中虾青素含量的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：

a)、绘制标准曲线：准确称取全反式虾青素标准品用丙酮溶解并定容，然后稀释成不同浓度，用液相色谱分析仪测定得到虾青素标准曲线；

b)、提取：将待测样品，加入二氯甲烷-丙酮溶液，超声混合提取，得到提取液；

c)、皂化：向步骤2)得到的提取液中加入氢氧化钠-甲醇溶液，涡旋混匀，充氮密封反应，然后在反应液中加入磷酸-甲醇溶液中和剩余的碱，混匀，过滤膜，得滤液；

d)、采用色谱法检测所述滤液中的虾青素含量，得到滤液中虾青素的含量；

e)、根据所述滤液中虾青素的含量，得到待测样品中虾青素的含量。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤b)中，所述二氯甲烷-丙酮溶液的二氯甲烷和丙酮的体积比为100:1500至100:200，更优选为100:800至100:300，更优选为100:400至100:500。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤b)中，所述二氯甲烷-丙酮溶液中可以加入少量的，例如约0.5g的2,6-二叔丁基对甲酚混合后使用，所述2,6-二叔丁基对甲酚作为抗氧化剂有助于减缓虾青素被氧化。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述待测样品为含有虾青素的片剂、注射剂、气雾剂、丸剂、胶囊剂、散剂或膏剂，优选为胶囊剂，更优选为软胶囊剂。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述软胶囊待测样品中含有虾青素、葡萄籽油中的一种或多种。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤b)中所述待测样品与二氯甲烷-丙酮溶液的用量比为300ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品至1000ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品；更优选的用量比为40ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品至160ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品；进一步优选的用量比为60ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品至160ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤b)中，所述混合的时间为5～10min。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤c)中，所述提取液与氢氧化钠-甲醇溶液体积比为5:1至5:2；所述氢氧化钠-甲醇溶液为称取0.8g氢氧化钠，用甲醇溶解并稀释至100ml，混合后使用；所述涡旋混匀的反应温度为2～6℃，反应时间为12～14h；所述磷酸-甲醇溶液为2ml磷酸和98ml甲醇混匀后使用。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤d)具体为：

d1)、对步骤b)中得到的滤液进行液相色谱检测，得到滤液中虾青素的峰面积；

d2)、根据所述滤液中虾青素的峰面积与步骤1)中绘制的虾青素的浓度-峰面积标准曲线对比，得到所述滤液中虾青素的含量。

10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤d)中，所述液相色谱检测的色谱柱优选为C30(250×4.6mm，0.5μm)柱；所述液相色谱检测的洗脱方式优选为梯度洗脱；所述液相色谱检测的波长优选为450～500nm，更优选为470～475nm；所述液相色谱检测的流动相的流速优选为0.5～2ml/min，更优选为0.8～1.2ml/min，最优选为1.0ml/min；所述液相色谱检测的柱温优选为20～30℃，更优选为25℃；所述液相谱检测的进样量优选为10～30μL，更优选为20μL，液相色谱检测结束后，得到上清液中虾青素的峰面积。