[发明专利]银杏内酯组合物的医药用途

说明书

本发明提供了银杏内酯组合物在制备治疗肌萎缩性侧索硬化药物中的应用。通过TDP‑25的稳定转染细胞模型和Wobbler大鼠模型，证实了本发明提出的银杏内酯组合物对TDP‑25蛋白具有抑制作用，且不同剂量银杏内酯组合物均能显著延缓Wobbler大鼠发病，延长存活期。两种模型均表明，银杏内酯组合物对肌萎缩性侧索硬化症均有较好的疗效。

技术领域

本发明属于涉及医药技术领域，特别是涉及银杏内酯组合物在治疗/预防肌萎缩性侧索硬化中的应用。

背景技术

肌萎缩性侧索硬化(amyotrophiclateralsclerosis，ALS)为肌肉萎缩症的一种。该疾病不影响人的心智，它主要导致肌肉衰弱和萎缩。发病晚期会导致舌肌萎缩、语音不清和吞咽困难以及全身性麻痹。该病发病年龄为30-50岁，1-5年后常因呼吸困难而导致死亡。通常说，异常磷酸化的神经丝在脊髓前角运动神经元聚集被认为可能是ALS的重要病理特征之一。神经丝属于细胞骨架蛋白，一般情况下，神经丝在神经元胞浆内以非磷酸化形式存在，而轴索内的神经丝以磷酸化形式存在，对维持轴索的直径等有重要作用。异常磷酸化的神经丝的可以抑制神经丝蛋白的降解，导致其在核周异常聚集，最终引起神经元变性、死亡。

最近，在肌萎缩侧索硬化患者的脑组织中发现了分子量约为43kDa的TARDNA结合蛋白(TDP-43)阳性包涵体。TDP-43是一种保守的，广泛表达的核蛋白，由1号染色体上TARDBP基因编码。病理状态下，TDP-43从细胞核向细胞质聚集，TDP-43功能与机理的发现丰富了我们关于ALS发病机制的理解。进一步的研究还发现，ALS患者是以胞质内聚集不溶性的、过度磷酸化的、泛素化的和蛋白水解裂开的C端片段在受累的脑和脊髓区域堆积为特征。尤其是25kDa的TDP-43蛋白C末端片段(TDP-25)在受累的脑区域聚集提示它可能涉及疾病的发病机制。研究表明，TDP-25过度表达足以引起TDP-43的错误定位和TDP-43在胞质内的异常积累。因此，科学家们建立了TDP-25的稳定转染细胞系，其可以稳定过表达TDP-25，在体外模拟肌萎缩侧索硬化症在细胞水平的病理变化，从而作为肌萎缩侧索硬化症研究的细胞模型。此外，有研究表明，表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对稳转TDP-25和TDP-43基因的NSC34细胞(鼠神经元细胞)活力具有显著的抑制作用。

在ALS动物模型方面，研究最多的是自然发病的动物模型，即：Wobbler大鼠模型。Wobbler大鼠之所以作为ALS的模型研究，是由于常染色体突变隐性遗传导致脊髓神经元退行性改变，这与ALS神经元受损和临床表现具有相似性。Wobbler大鼠表现为选择性的脊髓运动神经元受损，出现空泡样变性，肌肉出现失神经性萎缩，氨基酸和过氧化物的代谢异常，临床表现上累及动物的前肢肌肉，出现行走摇晃和前爪无力，渐到前爪瘫痪，电生理研究显示动物前肢失神经表现。Wobbler大鼠模型因其神经元变性的特点，适合于研究ALS疾病神经元变性的发病机制。

此外，多年来尽管有许多关于ALS疾病的药物研究，利鲁唑仍是惟一被FDA批准应用于治疗ALS的药物，但其也只能有限地延长病人的生存期。因此，关于ALS疾病的药物仍有待开发。近年来，中药抗肌萎缩侧索硬化症的研究逐渐引起人们的关注，而且由于很多中药组分属于天然提取药物，具有副作用小等优点。有鉴于此，本发明希望能从传统中药中寻找到ALS疾病治疗的新方案。

发明内容

本发明以在两种模型上进行验证的方式对银杏内酯组合物进行研究，旨在得到一种具有治疗或预防肌萎缩性侧索硬化的银杏内酯组合物。

由此，本发明提出了银杏内酯组合物在制备治疗或预防肌萎缩性侧索硬化药物中的应用。其中，所述肌萎缩性侧索硬化包括肌肉衰弱和萎缩，或者舌肌萎缩、语音不清、吞咽困难以及全身性麻痹等。

具体地，该银杏内酯组合物包括银杏内酯A、B、K，其中，以重量比计，银杏内酯A：银杏内酯B：银杏内酯K＝(20～40)：(50～75):(0.2～5)。