[发明专利]一种可同时标记细胞核的封片剂的制备方法在审
申请号: | 201711192562.0 | 申请日: | 2017-11-24 |
公开(公告)号: | CN107907399A | 公开(公告)日: | 2018-04-13 |
发明(设计)人: | 杨明理;何波 | 申请(专利权)人: | 遵义医学院 |
主分类号: | G01N1/36 | 分类号: | G01N1/36;G01N21/64 |
代理公司: | 遵义市遵科专利事务所52102 | 代理人: | 刘创先 |
地址: | 563000 *** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 标记 细胞核 片剂 制备 方法 | ||
1.一种可同时标记细胞核的封片剂的制备方法,其特征是,包含如下步骤:
1). 配制1mol/L Trizma Base:取12.11g Trizma Base溶于100ml去离子水,备用;
2). 配制1mol/L NaH2PO4·2H2O:取15.62g NaH2PO4·2H2O溶于100ml去离子水,备用;
3). 配制Tris-磷酸盐缓冲液:取1mol/L Trizma Base 50ml,用1mol/L NaH2PO4·2H2O调节pH至7.6,备用;
4). 配制50%甘油:取甘油100ml,加入100ml去离子水,充分混匀,高压灭菌,备用;
5). 封片剂配制:
a. 取上述配制好的Tris-磷酸盐缓冲液5ml和75ml去离子水充分混合;
b. 向步骤a制备的混合溶液中加入20g聚乙烯醇,充分搅拌混合,用保鲜膜密封,放置60℃水浴过夜;
c. 取三氯叔丁醇100mg与50%甘油30ml充分搅拌混合;
d. 取DAPI 0.1mg加入步骤c的溶液中,充分混匀;
e. 将步骤d溶液缓慢加入步骤b溶液中,一边加一边混匀;
f. 混合后的液体用保鲜膜密封,并用锡箔纸包裹避光,4℃保存,即成。
2.根据权利要求1所述的可同时标记细胞核的封片剂的制备方法,其特征是:所述步骤5)b中,聚乙烯醇的醇解度为87%-90%,分子量为30,000-70,000。
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