[发明专利]一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法

权利要求书

1.一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，其特征在于，步骤如下：

(1)试管苗的获得：

选择优质无核葡萄做母本，野生葡萄做父本，采取异地取粉方式；

在当地的野生葡萄父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；

到优质无核葡萄产区选择当地优质母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋；

授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；

(2)嫁接：

在3月将基部已经成熟的试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为一号苗；

(3)二次试管苗的获得：

选择一号苗做母本，优质香妃葡萄做父本，采取异地取粉方式；

在优质香妃父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；

选择一号苗优质母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋；

授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；

(4)二次嫁接：

在3月将基部已经成熟的二次试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为二号苗；

(5)育种：

以二号苗为砧木，以一号苗枝条为接穗进行第三次嫁接，用第三次嫁接成活的种苗枝条进行扦插，培育成优质葡萄新品种。

2.根据权利要求1所述的一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，其特征在于：所述胚挽救培养步骤为，首先剥取胚珠；将果穗用流水冲洗3-5分钟，剪成3-5粒的小穗于烧杯中，置于超净工作台上，用75％乙醇浸泡约1分钟，无菌水冲洗3-5次，再用0.1％升汞消毒7分钟，无菌水冲洗3-5次，切开幼果取出胚珠接种于内装40mL培养基的100mL三角瓶中，每瓶接种10-20粒，胚珠培养基采用B5或Ni stch为基本培养基，附加BA(6-苄氨基嘌呤)0.1-1.0mg/L、IAA(吲哚乙酸)1.0-2.0mg/L、GA(赤霉酸)0.3-0.8mg/L、6％蔗糖、0.6％琼脂、0.1％活性炭。

3.根据权利要求1所述的一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，其特征在于：在每次葡萄开花前在叶面喷洒0.05～0.1％浓度的硼酸溶液，在幼果期喷洒1-3％的过磷酸钙溶液，在果实生长后期喷洒0.02％的硫酸钾溶液。

4.根据权利要求1所述的一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，其特征在于：所述一号苗在生长时进行避雨和防日灼处理。