[发明专利]Hedycaffeoylglucoside A及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种式(I)所示咖啡酸葡萄糖苷类化合物Hedycaffeoylglucoside A的制备方法，

其特征在于，所述的制备方法按如下步骤进行：

(1)甲醇浸提：将剑叶耳草的藤茎粉碎干燥，加入甲醇浸提提取后滤除不溶物，所得滤液减压蒸干得到甲醇浸膏；

(2)乙酸乙酯萃取：将步骤(1)所得甲醇浸膏用乙酸乙酯萃取，将所得萃取后的水相减压蒸干得到水相浸膏；

(3)一次柱层析：用80～100目聚酰胺柱层析对步骤(2)所得水相浸膏进行柱层析分离，分别以25％乙醇、50％乙醇、75％乙醇、95％乙醇为洗脱剂A进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液A，将所得洗脱液A减压蒸除溶剂得粗品；

(4)二次柱层析：用200～300目柱层析硅胶继续对步骤(3)所得粗品进行柱层析分离，以二氯甲烷/甲醇体积比5：1～1：5的混合液为洗脱剂B，进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液B，将所得洗脱液B减压蒸除溶剂得到固体物质；

(5)洗涤除杂：将步骤(4)所得固体物质用二氯甲烷/甲醇混合溶剂进行洗涤除杂，所得固体产物经干燥得到所述式(I)所示的咖啡酸葡萄糖苷类化合物HedycaffeoylglucosideA。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述甲醇浸提的操作方法为：将粉碎干燥后的剑叶耳草藤茎与甲醇混合，在20～30℃下浸提5～10天，过滤得到甲醇提取液，所得滤渣重复浸提2～4次，合并每次所得甲醇提取液，减压蒸干，得到甲醇浸膏；所述的甲醇加入量以所述的剑叶耳草藤茎的质量计为3～5mL/g。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的乙酸乙酯萃取的操作方法为：将所得甲醇浸膏分散于5～10倍质量的水中，得到悬浮液用等体积的乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯相，减压回收溶剂，将萃取后的水相减压蒸干，得到水相浸膏。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述梯度洗脱的操作方法为：分别以25％乙醇、50％乙醇、75％乙醇、95％乙醇为洗脱剂A，进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液A，将所得洗脱液A减压蒸除溶剂得粗品；所述的洗脱剂A的流速为15～30mL/min，每种梯度的洗脱剂的洗脱时间为300～500min。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述梯度洗脱的操作方法为：以二氯甲烷/甲醇体积比分别为5：1、3：1、1：1、1：3、1：5的混合液为洗脱剂B，进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液B，将所得洗脱液B减压蒸除溶剂得到固体物质；所述的洗脱剂B的流速为10～20mL/min，每种梯度的洗脱剂的洗脱时间为250～400min。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述洗涤除杂的操作方法为：将步骤(4)所得固体产物和二氯甲烷/甲醇混合溶剂加入离心管中超声、离心，去除上清液，重复洗涤3次，所得产物经干燥得到式(I)所示的咖啡酸葡萄糖苷类化合物Hedycaffeoylglucoside A；所述的二氯甲烷/甲醇混合溶剂的加入量以所述的固体产物的质量计为10～20mL/g。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述的超声频率为40KHz，超声时间为10s。