[发明专利]一种基于液晶生物传感器检测天蚕素B的方法

权利要求书

1.一种基于液晶生物传感器检测天蚕素B的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)玻片的预处理

将玻片切割成所需大小，用新配制的Piranha溶液于80℃充分浸泡，再分别用乙醇和去离子水清洗干净，经N₂吹干，干燥，防尘备用；

2)玻片的组装

2-1)上玻片的DMOAP溶液组装：将经过步骤1)预处理的玻片浸入DMOAP水溶液中，用体积分数0.2%的DMOAP水溶液浸泡30min，充分浸泡后，用超纯水冲洗干净，N₂吹干，干燥，防尘备用；

2-2)下玻片的TEA和DMOAP混合溶液组装：将经过步骤1)预处理的玻片浸入50℃的TEA:DMOAP体积比为2:1的醋酸-醋酸钠溶液中，用含体积分数2%TEA且含体积分数1%DMOAP的溶液在50℃下恒温2h，使基底表面存在功能化的自组装膜，充分浸泡后，用超纯水冲洗干净，N₂吹干，干燥，防尘备用；

3)天蚕素B的固定

取适量的天蚕素B溶液滴加至下玻片表面，用洗耳球吹开，于37℃温育2.5h，取出后分别用PBS缓冲液和超纯水冲洗，除去未固定的天蚕素B分子，N₂吹干，冷冻保存；固定化天蚕素B浓度为100ng/ml；

4)天蚕素B抗原抗体竞争免疫反应

将一定浓度的天蚕素B抗体溶液与不同浓度的天蚕素B溶液37℃恒温混匀10min后滴加至固定有抗原的玻片上，用洗耳球吹开，于37℃温育1.5h，抗原抗体即可实现免疫竞争反应；分别用PBS缓冲液和超纯水冲洗，N₂吹干备用；

5)液晶池的制作

液晶池由上玻片和下玻片面对面组装而成，玻片之间用Mylar聚酯片隔开，Mylar聚酯片中间开凸型空腔，除开孔方向外，其它三边边缘用小夹子固定；先将液晶5CB加热到40℃使其呈各向同性的液态，然后将其从Mylar聚酯片开孔处注入并通过毛细管作用力布满整个空腔，自然冷却到28℃，用偏光显微镜观察其光学现象。