[发明专利]ELISA检测微流控芯片和ELISA检测微流控芯片体系以及它们的应用

说明书

本发明涉及微流控芯片ELISA检测技术领域，特别涉及ELISA检测微流控芯片和ELISA检测微流控芯片体系以及它们的应用。芯片包括：进样单元(1)、储液单元(2)、反应单元(3)及废液单元(4)；该微流控芯片还包括用于对待检样本定量的第一定量单元(5)，第一定量单元包括第一狭缝(51)、以及由第一狭缝隔开的第一样本腔室(52)和第二样本腔室(53)；第一样本腔室与所述进样单元相通，第二样本腔室与所述废液单元相通。芯片体系由上中下三层组成；中层为所述芯片；上下层用于覆盖封闭中层；上层有与进样单元连接的进样孔，及对应储液单元的让位孔。所述芯片检测过程简单，可对反应样本进行定量，灵敏度高、重复性强。

技术领域

本发明涉及微流控芯片ELISA检测技术领域，特别涉及一种ELISA检测微流控芯片和一种ELISA检测微流控芯片体系，以及它们在ELISA检测中的应用。

背景技术

微流控芯片技术(microfluidics)又被称为微流控芯片实验室或芯片实验室(lab-on-a-chip)，指的是在一块几平方厘米的芯片上构建的化学或生物实验室，它把化学和生物学等领域中所涉及的样品制备，反应，分离，检测，细胞培养，分选，裂解等基本操作单元集成到一块很小的芯片上，由微通道形成网络，以可控流体贯穿整个系统，用以实现生物，化学，医学诊断等领域中的各种功能。

微流控芯片技术的基本特征和最大优势是：多种单元结构在微小的芯片平台上可以灵活组合使得芯片设计上灵活多变且功能齐全；微小的芯片内部结构单元所需要的检测样本量非常少，且微结构单元的大比表面积允许内部试剂快速扩散以实现快速反应和检测；微流控芯片一般是由配套仪器自动完成内部反应，故而在实际测试过程中，微流控芯片技术可以减少对医学检测人员的技术要求，降低检测的人为失误，进而降低患者的医学检测成本；微流控芯片技术由于采用仪器自动化完成，故而内部反应过程完全可控，如此可以得到更加准确，更加灵敏的检测数据。

在医学检测领域中，体外诊断(In-Vitro-Diagnostics,IVD)是一个非常重要的分支，是指在人体体外，对来源于人体的样本(如血液，尿液，唾液等体液)进行检测从而获取临床诊断信息，根据该信息来判断受检者是否患有某种疾病或经受某种病菌感染的诊断方法。目前，随着生物技术，特别是生物化学，免疫学，分子生物学的快速发展，体外诊断根据检测原理和检测方法主要有生化诊断，免疫诊断，分子诊断，微生物诊断，凝血类诊断，流式细胞诊断等方面，其中生化，免疫，分子诊断是目前我国体外诊断的主要细分领域。

在免疫诊断领域中，目前所使用的检测方法根据原理主要有，胶体金法，乳胶比浊法，荧光免疫法，时间分辨荧光法，酶联免疫吸附测定法(ELISA)，化学发光法。其中胶体金法检测范围有限，准确度不高，乳胶比浊法虽然简单直观，但是只能针对特定体液蛋白质，而且检测范围比较窄，荧光免疫法只是在细菌，病毒，皮肤活性等领域应用较多，而且存在非特异性染色等问题，时间分辨荧光法是对荧光免疫法的进一步优化，但是其操作步骤较多，操作复杂，需要熟练的专业技能人员来操作。

酶联免疫吸附测定法(ELISA)是20世纪70年代发展起来的一种检测技术，但由于该方法具有灵敏度高，特异性强，准确率高，可检测的目标分子种类多等优势，在体外诊断中的应用也越来越广泛。目前，ELISA法在临床检验中可以用于体液中的各种蛋白质，包括含量极少的蛋白质，激素类比如小分子量的甾体激素等，抗生素和药物，病原体抗原，HBsAg，HBeAg等的检测。