[发明专利]一种定量检测C反应蛋白的试剂盒及制备方法

说明书

本发明提供了一种定量检测C反应蛋白的试剂盒及其制备方法，该试剂盒包括标记示踪物的C反应蛋白的单克隆抗体；包被有C反应蛋白的单克隆抗体的载体；C反应蛋白校准品和洗涤液；化学发光底物液。同时，试剂盒的制备方法包括，示踪物标记C反应蛋白的单克隆抗体；以C反应蛋白的单克隆抗体包被载体；以C反应蛋白纯品配制CRP校准品；分装上述C反应蛋白校准品、标记示踪物的C反应蛋白的单克隆抗体、和该示踪物所作用的化学发光底物；组装为成品。本发明的试剂盒灵敏度高，特异性好，定量检测结果准确度高，使用成本低，更易推广应用。

技术领域

本发明涉及生物医学领域，特别涉及一种定量检测C反应蛋白的试剂盒及其制备方法。

背景技术

C－反应蛋白（C-neactveprotein,简称CRP），早于1930年发现，是一种能与肺炎球菌C多糖体反应形成复合物的急性时相反应蛋白。并且在机体受到感染或组织损伤时血浆中一些急剧上升的蛋白质（急性蛋白），激活补体和加强吞噬细胞的吞噬而起调理作用，清除入侵机体的病原微生物和损伤，坏死，凋亡的组织细胞。近年来，由于检测技术的更新，测定CRP的快速、简便和可靠的方法已迅速建立。使CRP在临床应用领域大大增加，其在医学上的价值正得到广泛验正和承认。CRP在炎症开始数小时就升高，48小时即可达峰值，随着病变消退、组织、结构和功能的恢复降至正常水平。此反应不受放疗、化疗、皮质激素治疗的影响。因此，CRP的检测在临床应用相当广泛，包括急性感染性疾病的诊断和鉴别诊断，手术后感染的监测；抗生素疗效的观察；病程检测及预后判断等。

现有技术检测血清学指标的方法主要包括放射性同位素免疫分析、生化免疫分析、酶联免疫吸附方法和化学发光免疫分析。近十年来标记免疫分析技术的研究和应用发展迅速，已广泛应用于生物医学基础理论研究及临床疾病诊断各领域。但现有技术中对CRP的检测方法一般都有各自的特点及不足：放射性同位素免疫分析结果比较准确，缺点是耗时长，操作复杂，放射性标记物会对实验人员产生危害，并且会产生环境污染，目前已经逐渐被其他方法所替代；生化免疫法已被广泛应用，但其检测灵敏度低；酶联免疫吸附方法目前存在结果受环境影响大，灵敏度低等缺点，并且不适合随机检测；现有技术的使用化学发光免疫分析技术在CRP免疫分析产品的应用多为定性检测，定量检测的技术也存在灵敏度低，特异性差的缺点， 主要是所使用的抗体原料的亲和力弱引起，从而限制了推广使用，无法广泛地应用于临床诊断和科研工作。

发明内容

本发明提供一种定量检测C反应蛋白的试剂盒及制备方法，克服现有技术的只能定性检测或者定量检测灵敏度低，特异性差的缺点。本发明研制的C反应蛋白测定试剂盒（化学发光法）采用的是双抗体夹心一步法反应模式，采用C反应蛋白单克隆抗体制备固相，特异性的单克隆抗体纯度高、无传染性，非特异结合反应小，可以大批量生产，同时本发明的试剂盒灵敏度高，特异性好，定量检测结果准确度高，使用成本低，更易推广应用。

一方面，本发明提供了一种定量检测C反应蛋白的试剂盒，本发明的试剂盒包括：

1）吖啶脂标记的C反应蛋白的单克隆抗体；

2）包被有C反应蛋白的单克隆抗体的载体；

3）C反应蛋白校准品；

4）上述吖啶脂所作用的化学发光底物。

另一方面，本发明提供了一种定量检测C反应蛋白的试剂盒的制备方法，该方法包括：

1）用吖啶脂标记C反应蛋白的单克隆抗体；

2）以C反应蛋白的单克隆抗体包被载体；

3）以C反应蛋白纯品配制C反应蛋白校准品；

4）分装上述C反应蛋白校准品、吖啶脂标记的C反应蛋白的单克隆抗体和该酶所作用的化学发光底物；

5）组装为成品。