[发明专利]一种从复杂样本中快速检测腐烂茎线虫的LAMP引物组和方法有效
| 申请号： | 201711216972.4 | 申请日： | 2017-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN107988383B | 公开（公告）日： | 2020-12-11 |
| 发明（设计）人： | 徐春玲;丁善文;韩玉春;赵立荣;谢辉 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 任重 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 复杂 样本 快速 检测 腐烂 线虫 lamp 引物 方法 | ||
1.一种从复杂样本中快速检测腐烂茎线虫的LAMP引物组，其特征在于，包括一对外引物F3/B3、一对内引物FIP/BIP和一条环引物LF；序列依次如SEQ ID NO.1～5所示；
所述复杂样本为多种线虫混合的样品、植物组织样品或土壤样品。
2.一种从复杂样本中快速检测腐烂茎线虫的LAMP方法，其特征在于，以待测样品DNA为模板，利用权利要求1所述LAMP引物组进行LAMP扩增；根据扩增结果判断待测样品中是否含有腐烂茎线虫；
LAMP扩增的体系如下：
LAMP扩增的反应条件为：在65℃温育50min以上，85℃保温5min。
3.根据权利要求2所述的LAMP方法，其特征在于，所述根据扩增结果判断待测样品中是否含有腐烂茎线虫的具体方法为：利用电泳检测法或荧光染料目测检测法对LAMP扩增进行检测。
4.权利要求1所述LAMP引物组或权利要求2～3任一所述LAMP方法在检测和/或鉴定腐烂茎线虫中的应用。
5.权利要求1所述LAMP引物组或权利要求2～3任一所述LAMP方法在从复杂样品中检测和/或鉴定腐烂茎线虫中的应用，其特征在于，所述复杂样品包括混合线虫样品、植物组织样品和/或土壤样品。
6.一种从复杂样本中快速检测腐烂茎线虫的LAMP试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述LAMP引物组。
7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，还含有SYBR Green I染料和LAMP扩增所需试剂。
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