[发明专利]一种黑皮鸡枞菌原种的制种方法

权利要求书

1.一种黑皮鸡枞菌原种的制种方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1）：母种制备，具体包括：

步骤1.1）：在无菌条件下对黑皮鸡枞菌的子实体做组织分离，分离得子实体菌丝体；

步骤1.2）：对黑皮鸡枞菌的假根做组织分离，分离得假根菌丝体；

步骤1.3）：将子实体菌丝体转接到装有液体培养基的试管内，22-25℃下培养，待菌丝长至1.3-1.8cm 时接入假根菌丝体，继续培养5-8日即得成熟母种；

步骤2）：原种制备，将步骤1）制得的成熟母种接入原种培养基，培养20-25天即可成熟，制得原种；

所述原种培养基的成分及质量份数配比为：植物杆粉50份、杂粮粉5-20份、共生菌液0.5-5份、蔗糖0.5-2份、有机酸0.5-2份、金属盐0.5-3份、无机矿物质粉0.5-2份、愈创木酚0.01-0.05份、适量水。

2.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌原种的制种方法，其特征在于，所述液体培养基成分为：土豆汁1000ml、琼脂20g、葡萄糖20g、有机酸盐3-5g。

3.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌原种的制种方法，其特征在于，所述液体培养基的制备方法为：将土豆100g 放入1000ml 水中加热，煮沸后继续加热20-30 分钟，趁热过滤，滤液中加水补足1000ml 后，并加入琼脂20g、葡萄糖20g、有机酸盐3-5g，待完全溶化后，高压灭菌，灭菌后分装试管即得母种培养基。

4.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌原种的制种方法，其特征在于，所述植物杆粉为棉籽壳、木屑、玉米芯中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌原种的制种方法，其特征在于，所述杂粮粉为米糠、麸皮、玉米粉、小麦粉、吞豆粉中的一种或多种。

6.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌原种的制种方法，其特征在于，所述有机酸为氨基酸、硬脂酸、棕榈酸、甘油酸酯中的一种或多种。

7.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌原种的制种方法，其特征在于，所述金属盐为磷酸二氢钾、氯化钠、氯化钙、氯化钴、硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁、硫酸铜、硫酸锌、硫酸铝钾中的一种或多种。

8.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌原种的制种方法，其特征在于，所述无机矿物质粉为石膏粉、轻质碳酸钙、滑石粉、石灰粉中的一种或多种。

9.根据权利要求1所述的黑皮鸡枞菌原种的制种方法，其特征在于，所述共生菌液的制备方法为：将从野外挖巢获得的黑翅土白蚁菌圃用工具碾碎，然后按照菌圃：无菌水=1：9的质量比混合，搅拌均匀，静置2小时，取上清液即为共生菌液。