[发明专利]细胞培养装置

说明书

本申请为分案申请，原申请的申请日为2013年4月16日，申请号为201380031394.0(PCT/US2013/036816)，发明名称为“细胞培养装置”。

相关申请的交叉引用

本申请要求提交于2012年4月16日的美国临时申请号61/624,643的权益，该临时申请通过引用并入此处。

发明背景

本发明涉及细胞培养和检测领域。

在许多产业中，尤其在食品、饮料、医疗保健、电子和制药产业中，快速地分析样品被诸如细菌、酵母或霉菌等微生物污染的程度是必需的。

一种微生物培养技术，被称为微生物计数或菌落计数，定量在样品中的微生物细胞的数量。基于原位微生物复制的微生物计数方法通常针对样品中的每个微生物细胞生成一个视觉上可测量的“菌落”。因此，计数可见的菌落允许微生物学家准确地确定在样品中的微生物细胞的数量。为进行微生物计数，可将细菌细胞散布于皮氏培养皿（“琼脂平板”）中的营养琼脂表面并在允许原位细菌复制的条件下孵育。微生物计数是简单的、极灵敏的、便宜的且定量的，但也可能是慢的。

存在对用于快速微生物计数的另外的培养装置和方法的需求。

发明概要

本发明提供了用于捕获和培养微生物（例如，存在于环境样品中的）的装置和试剂盒。在一个方面中，本发明提供了细胞培养装置，其包括：包含微生物营养培养基的基底；覆盖营养培养基的多孔膜；以及与基底配合以遮盖所述膜和营养培养基的盖子。营养培养基具有在基底上凸起的平面生长区域和从平面生长区域的边缘向基底倾斜的周向区域，并且该营养培养基能够维持在生长区域中的微生物的生长。在某些实施方案中，基底包含聚苯乙烯。基底也可包括周向凹槽，横跨所述周向凹槽封接所述膜。所述膜包括，例如，混合纤维素酯膜。膜可以是基本上无发射光和基本上无反射的和/或黑色的。

在其它的实施方案中，生长区域在样品采集前具有100-450 µm的平整度或在样品采集后具有300-500 µm的平整度。营养培养基可以维持或不维持在周向区域中的微生物的生长。膜可以通过封接至基底的薄膜附接于基底。备选地，装置可进一步包括应用于基底和周向区域的薄膜，其中该薄膜将膜粘附于基底。

在另一方面中，本发明提供了这样的细胞培养装置，其包括：包含微生物营养培养基的基底，其中该营养培养基具有在基底上凸起的平面生长区域（例如，约100-450微米的平整度），其中该营养培养基能够维持在生长区域中的微生物的生长；覆盖营养培养基的薄膜，其中该薄膜和该营养培养基具有从平面生长区域的边缘向基底倾斜的周向区域，并且该薄膜具有开口以暴露出平面生长区域的一部分；和与基底配合以遮盖营养培养基的盖子。在另一个实施方案中，该装置还包括与暴露的生长区域接触的多孔膜。

在另一方面中，本发明提供了用于细胞培养的包括细胞培养装置的试剂盒，该装置包括包含微生物营养培养基的基底，其中该营养培养基具有在基底上凸起的平面生长区域（例如，约100-450微米的平整度），其中该营养培养基能够维持在生长区域中的微生物的生长；和覆盖营养培养基的薄膜（例如，无孔薄膜），其中该薄膜和该营养培养基具有从平面生长区域的边缘向基底倾斜的周向区域，并且该薄膜具有开口以暴露出平面生长区域的一部分；配置用于放置在平面生长区域的暴露部分上的多孔膜；和与基底配合以遮盖膜和营养培养基的盖子。在另一个实施方案中，薄膜具有用于将膜放置到生长区域上的基准标志。在一个实施方案中，试剂盒也包括过滤装置，例如WO 2007/038478中的装置，WO 2007/038478通过引用并入此处。