[发明专利]一种人的肽基-脯氨酰顺反异构酶B突变蛋白及其应用在审
申请号: | 201711224919.9 | 申请日: | 2017-11-29 |
公开(公告)号: | CN109837269A | 公开(公告)日: | 2019-06-04 |
发明(设计)人: | 张耀洲;吴玉乾;冯建华;李冬梅;张树军;胖铁良;陈玉皎;王文雅 | 申请(专利权)人: | 天津市湖滨盘古基因科学发展有限公司 |
主分类号: | C12N9/90 | 分类号: | C12N9/90;C07K16/40;C40B40/08;G01N33/574;G01N33/577 |
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地址: | 300300 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 顺反异构 突变蛋白 脯氨 肽基 癌症 单克隆抗体 基因检测 基因芯片 基因诊断 制备 应用 诊断 治疗 分析 发现 研究 | ||
1.一种人的肽基-脯氨酰顺反异构酶B突变蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。
2.一种人的肽基-脯氨酰顺反异构酶B突变蛋白的编码基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.一种基因芯片,其特征在于,包括:固相载体和固定在该载体上的核苷酸探针;所述核苷酸探针根据所述人的肽基-脯氨酰顺反异构酶B突变蛋白的核苷酸序列,与人的肽基-脯氨酰顺反异构酶B正常蛋白的核苷酸序列的比对结果确定。
4.根据权利要求3所述的基因芯片,其特征在于,所述核苷酸探针为SEQ ID NO:3所示的碱基序列。
5.一种特异性识别人的肽基-脯氨酰顺反异构酶B突变蛋白的单克隆抗体,其特征在于,其编码的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示。
6.一种用于检测人的肽基-脯氨酰顺反异构酶B突变蛋白的抗体的ELISA试剂盒,其特征在于,所述ELISA试剂盒包括:包被有权利要求5所述单克隆抗体的ELISA酶标板、酶标二抗、检测对象的肽基-脯氨酰顺反异构酶B蛋白、样品稀释液、包被缓冲液、ELISA酶标板洗涤液、显色液和终止液。
7.根据权利要求6所述用于检测人的肽基-脯氨酰顺反异构酶B突变蛋白的抗体的ELISA试剂盒,其特征在于,所述酶标二抗为稀释的HRP辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG。
8.一种基于权利要求6或7所述ELISA试剂盒检测人的肽基-脯氨酰顺反异构酶B突变蛋白的抗体的方法,其特征在于,包括:
a、使用所述包被缓冲液对权利要求5所述单克隆抗体进行稀释,并将稀释后的所述单克隆抗体加样至ELISA酶标板的孔中,并室温孵育;
b、使用所述样品稀释液将检测对象的肽基-脯氨酰顺反异构酶B蛋白稀释成不同浓度梯度,并将不同浓度梯度的肽基-脯氨酰顺反异构酶B蛋白分别加样至ELISA酶标板的孔中,并室温孵育;
c、甩去各孔中的液体,加入所述ELISA酶标板洗涤液,洗涤并甩干;
d、加入所述酶标二抗,并室温孵育;
e、甩去各孔中的液体,加入所述ELISA酶标板洗涤液,洗涤并甩干;
f、加入所述显色液,室温避光孵育,并加入所述终止液终止反应;
g、在酶标仪上450nm测定OD值。
9.根据权利要求8所述ELISA试剂盒检测人的肽基-脯氨酰顺反异构酶B突变蛋白的抗体的方法,其特征在于,进一步包括:空白对照实验。
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