[发明专利]Homer3单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了Homer3单克隆抗体及其应用。本发明提供两株能稳定分泌特异性识别Homer3蛋白的单克隆抗体Homer3 1B11及Homer3 2F6的杂交瘤细胞株，其保藏编号分别为CCTCC No:C2017192、CCTCC No:C2017194。利用本发明提供的能够识别不同天然Homer3蛋白抗原位点的单克隆抗体制备了用于检测Homer3蛋白的免疫检测工具。本发明的双抗夹心ELISA方法批内变异系数为8.1%，其最低检测浓度为93 pg/ml。因此，本发明的单克隆抗体具有更广泛的应用空间。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，特别涉及Homer3的单克隆抗体，产生该抗体的杂交瘤细胞株，以及该抗体的免疫检测用途。

背景技术

Homer蛋白是在细胞内信号转导过程中非常重要的一种骨架蛋白，它参与了许多神经细胞的活动，包括调节钙离子的平衡及学习与记忆过程中突触重塑的细胞骨架的构成等。Homer蛋白家族包括了三个成员，Homer1、Homer2和Homer3，他们通过外显子不同的剪接，有形成了多种亚型。所有的亚型都含有N-端的EVH1区域，该区域可以和mGluR、IP₃R、TRPC等富含脯氨酸蛋白结合，长型Homer蛋白在C-端存在CC区域，通过CC区域Homer蛋白之间可以形成同源或异源二聚体，而短型的Homer不存在CC-区域，则不能形成二聚体，但可以通过其EVH1区域与长型Homer竞争与富含脯氨酸的受体蛋白结合，从而来调节mGluR、IP₃R、TRPC等受体的功能。Homer3蛋白是一种长片段Homer蛋白。研究表明Homer3蛋白在老年痴呆症的发病中扮演着重要的角色，Homer3蛋白与淀粉样前体蛋白结合形成复合体，调节β淀粉样蛋白的形成，从而影响阿尔兹海默病的进展。同时，Homer3蛋白在外周组织中有不同程度的表达，如肺脏、肝脏及免疫细胞中，但是其在这些组织中扮演的角色及含量还需要进一步研究。目前，市场上还没有出现针对Homer3蛋白的单克隆抗体。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供两株能稳定分泌特异性识别Homer3蛋白不同位点的单克隆抗体Homer3 1B11及Homer3 2F6的杂交瘤细胞株以及该两种单克隆抗体在制备用于检测Homer3蛋白的免疫检测工具中的应用。本发明的单克隆抗体效价高、特异性强，因此具有更广泛的应用空间。

为实现上述目的本发明提供以下技术方案：

在本发明的第一方面，提供分泌Homer3单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于，其保藏编号为CCTCC NO：C2017192和CCTCC NO：C2017194，均是His-Homer3免疫小鼠后至尾血效价检测达1:25600后，加强免疫后进行细胞融合，His-Homer3(116-350aa)肽段筛选获得，Homer3对应的氨基酸序列为SEQ NO:1，Homer3(116-350aa)的氨基酸序列对应SEQ NO:1的第116aa-350aa。

在本发明的第二方面，提供一种Homer3单克隆抗体Homer3 1B11，由编号为CCTCCNO：C2017192的杂交瘤细胞株分泌。

在本发明的第三方面，提供一种Homer3单克隆抗体Homer3 2F6，由编号为CCTCCNO：C2017194的杂交瘤细胞株分泌。

在本发明第四方面，提供单克隆抗体Homer3 1B11和Homer3 2F6在制备用于检测Homer3蛋白的免疫检测工具中的应用。

优选地，所述免疫检测工具为试剂盒、芯片或试纸。

优选地，所述试剂盒为定量检测Homer3蛋白含量的双抗夹心酶联免疫(ELISA)试剂盒，优选地，Homer3 2F6作为包被酶标板的抗体，Homer3 1B11作为检测抗体。